Publicaciones CEMIBA

Viruses that affect Argentinian honey bees (Apis mellifera)

2026-04-09T16:32:57Z

Articulo Archives of Virology; vol. 166, no. 6 Beekeeping is a widespread activity in Argentina, mainly producing honey that has gained both national and international recognition. There are more than 3,000,000 hives in the country, mainly concentrated in Buenos Aires Province (approximately 1,000,000 hives). In recent decades, worrying rates of hive loss have been observed in many countries around the world. In Latin America, the estimated loss of hives is between 13% (Peru and Ecuador) and 53% (Chile). Argentina had annual losses of 34% for the period of October 1, 2016 to October 1, 2017. The causes of these losses are not clear but probably involve multiple stressors that can act simultaneously. One of the main causes of loss of bee colonies worldwide is infestation by the ectoparasitic mite Varroa destructor in combination with viral infections. To date, 10 viruses have been detected that affect honey bees (Apis mellifera) in Argentina. Of these, deformed wing virus, sacbrood virus, acute bee paralysis virus, chronic bee paralysis virus, and Israeli acute bee paralysis can be transmitted by mites. Deformed wing virus and the AIK complex are the viruses most often associated with loss of hives worldwide. Considering that bee viruses have been detected in Argentina in several hymenopteran and non-hymenopteran insects, these hosts could act as important natural reservoirs for viruses and play an important role in their dispersal in the environment. Further studies to investigate the different mechanisms by which viruses spread in the environment will enable us to develop various strategies for the control of infected colonies and the spread of viruses in the habitat where they are found.

Producción de la glicoproteína C recombinante de alfaherpesvirus equino 1 y evaluación de la respuesta inmune inducida en ratones

2021-10-12T20:03:07Z

Articulo Production of recombinant glycoprotein C from Equid alphaherpesvirus 1 and evaluation of the immune response induced in mice Analecta Veterinaria; vol. 41, no. 1 El alfaherpesvirus equino 1 (EHV-1) produce enfermedad respiratoria, abortos, muerte perinatal y desórdenes neurológicos en miembros de la familia Equidae. Las glicoproteínas de la envoltura viral son los antígenos inmunodominantes que generan respuesta inmune en animales infectados. La infección natural y las vacunas disponibles proporcionan protección parcial y de corta duración contra la reinfección. En este trabajo se expresó la glicoproteína C viral utilizando un baculovirus recombinante y se analizó la capacidad de inducir inmunidad protectora en ratones BALB/c al ser desafiados con el virus. Se evaluaron diferentes rutas de administración y distintos adyuvantes. La glicoproteína C indujo una respuesta IgG específica en suero; sin embargo, no logró evitar la entrada del virus al pulmón ni la aparición de signos clínicos, los cuales fueron variables entre los diferentes grupos de ratones. En todos los grupos inmunizados se retrasó la entrada del virus al pulmón y, cuando se utilizaron adyuvantes, el título viral fue significativamente menor que en el grupo control, así como en el grupo inmunizado por vía intranasal. Se concluye que la glicoproteína C producida indujo protección parcial frente al desafío viral según el adyuvante y la vía de inmunización.; Equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) causes respiratory disease, abortions, perinatal death and neurological disorders in horses. Envelope glycoproteins are the most immunodominant antigens in infected animals. Natural infection and available vaccines provide partial and short-term protection against reinfection. In this study, EHV-1 glycoprotein C was expressed with a recombinant baculovirus and the ability to induce protective immunity in BALB/c mice challenged with the virus was analyzed. Different routes of administration and adjuvants were evaluated. Glycoprotein C induced a specific IgG response in serum. However, it failed to prevent entry of the virus into the lung or the appearance of clinical signs, which were variable among different treatment groups. Entry of the virus into the lung was delayed in all immunized groups. The viral titer was significantly lower when adjuvants were used, as well as in the intranasally immunized groups compared to the control group. Therefore, glycoprotein C induced partial protection against the challenge with the virus, depending on the adjuvant and the route of immunization.

Intra-colonial viral infections in western honey bees (Apis Mellifera)

2021-09-23T04:04:39Z

Articulo Microorganisms; vol. 9, no. 5 RNA viruses play a significant role in the current high losses of pollinators. Although many studies have focused on the epidemiology of western honey bee (Apis mellifera) viruses at the colony level, the dynamics of virus infection within colonies remains poorly explored. In this study, the two main variants of the ubiquitous honey bee virus DWV as well as three major honey bee viruses (SBV, ABPV and BQCV) were analyzed from Varroa-destructor-parasitized pupae. More precisely, RT-qPCR was used to quantify and compare virus genome copies across honey bee pupae at the individual and subfamily levels (i.e., patrilines, sharing the same mother queen but with different drones as fathers). Additionally, virus genome copies were compared in cells parasitized by reproducing and non-reproducing mite foundresses to assess the role of this vector. Only DWV was detected in the samples, and the two variants of this virus significantly differed when comparing the sampling period, colonies and patrilines. Moreover, DWV-A and DWV-B exhibited different infection patterns, reflecting contrasting dynamics. Altogether, these results provide new insight into honey bee diseases and stress the need for more studies about the mechanisms of intra-colonial disease variation in social insects.

Clinical and molecular aspects of veterinary coronaviruses

2021-04-07T04:07:14Z

Preprint Virus Research; vol. 297 Coronaviruses are a large group of RNA viruses that infect a wide range of animal species. The replication strategy of coronaviruses involves recombination and mutation events that lead to the possibility of cross-species transmission. The high plasticity of the viral receptor due to a continuous modification of the host species habitat may be the cause of cross-species transmission that can turn into a threat to other species including the human population. The successive emergence of highly pathogenic coronaviruses such as the Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS) in 2003, the Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus in 2012, and the recent SARS-CoV-2 has incentivized a number of studies on the molecular basis of the coronavirus and its pathogenesis. The high degree of interrelatedness between humans and wild and domestic animals and the modification of animal habitats by human urbanization, has favored new viral spreads. Hence, knowledge on the main clinical signs of coronavirus infection in the different hosts and the distinctive molecular characteristics of each coronavirus is essential to prevent the emergence of new coronavirus diseases. The coronavirus infections routinely studied in veterinary medicine must be properly recognized and diagnosed not only to prevent animal disease but also to promote public health.

Patogenicidad viral de cepas del virus de arteritis equina en la activación de las vías intrínseca y extrínseca de apoptosis

2021-02-13T04:05:20Z

Objeto de conferencia XXVII Jornadas de Jóvenes Investigadores de la Asociación de Universidades Grupo Montevideo (Brasil, 23 al 25 de octubre de 2019) La apoptosis se considera un componente vital de varios procesos fisiológicos normales de las células. Se ha encontrado que un gran número de virus modulan el proceso de muerte celular programada o apoptosis de las células que infectan. Las dos vías mejor caracterizadas y estudiadas son la vía intrínseca y la vía extrínseca de apoptosis celular. Dentro de los virus que han encontrado una ventaja en la inducción de este mecanismo, se destacan los de genoma ARN (Archambault & St-Laurent, 2000; Koyama, 1995; Lin et al., 2002; Maestre et al., 2011; St-Louis et al., 2007; Sur et al., 1998; Thomson, 2001). El virus de arteritis equina (VAE) es un virus ARN de importancia en medicina veterinaria equina en el cual se ha asociado la infección in vitro por este virus con la inducción del proceso de muerte celular (Archambault & St-Laurent, 2000). El siguiente trabajo busca analizar los cambios morfológicos observados in vitro y correlacionarlos con cambios moleculares ocurridos en las células infectadas durante el proceso de muerte celular programada o apoptosis. Eje: Virología Molecular

Desarrollo de una técnica de inmunodifusión para la detección del virus Sacbrood en abejas

2020-10-22T20:06:02Z

Articulo Development of an immunodiffusion technique for the detection of Sacbrood bee virus InVet; vol. 18, no. 2 La apicultura es una de las actividades agrícolas más importantes de la República Argentina. En los últimos años se ha observado, a nivel mundial, una marcada disminución en el número de abejas. La mortalidad de las abejas, puede atribuirse a la interacción de factores ambientales, al manejo de las colonias o a la acción de diversos microorganismos, entre ellos los virus. Teniendo en cuenta que en la Argentina en este momento solamente se cuenta con técnicas de diagnostico moleculares para la detección de virus, el objetivo de este trabajo fue desarrollar un test de inmunodifusión que permita la detección del Virus de la Cría Ensacada de forma más sencilla y económica. Para ello una cepa autóctona del virus Virus de la Cría Ensacada fue utilizada para inocular un conejo a partir del cual se obtuvieron anticuerpos específicos contra este virus, que posteriormente fueron utilizados para estandarizar la técnica de inmuodifusión. Esta técnica podría ser de gran utilidad en el futuro para realizar un relevamiento rápido de las condiciones sanitarias para SBV en colmenas de la República Argentina ya que debido a su baja complejidad podría ser llevada a cabo en laboratorios de baja complejidad de todo el país.; Beekeeping is one of the most important agricultural activities in Argentine.In recent years, there has been a decrease in the number of bees worldwide. The mortality of bees can be attributed to several factors, such as the interaction of environmental factors, wrong management of colonies or the action of various patognes, including viruses. Considering that in Argentina, only molecular diagnostic techniques are available for the detection of viruses, the objective of this work was to develop an immunodiffusion test that allows the detection of the sacbrood bee virus as a simpler and Economical alternative. To developed the immunodiffusion test we use an indigenous virus strain of sacbrood was used to inoculate a rabbit from which specific antibodies were obtained against this virus. Later were used to standardize the immuodiffusion technique. This technique could be very useful in the future to carry out a rapid survey of the sanitary conditions for SBV in hives of Argentine, because due to its low complexity it could be carried out in laboratories of low complexity throughout the country.

Detection and molecular characterization of porcine parvovirus in fetal tissues from sows without reproductive failure in Argentina

2020-10-31T04:08:21Z

Articulo Heliyon; vol. 5, no. 11 Porcine parvovirus (PPV) is one of many pathogens responsible for reproductive failure in pregnant sows. Several studies have reported the appearance of new PPV strains that differ from previous isolates both genetically and antigenically. Thus, the protective effects of commercially inactivated vaccines could not be complete. In South America, the information about PPV is limited. Thus, the aim of the present study was to detect and characterize the PPV strains present in 131 mummies or stillbirths from normal deliveries in sows from a commercial swine farm of Argentina that uses the commercial vaccine. PCR results showed that 17/131 were positive to PPV. Ten of these viruses were isolated and sequenced. All viruses were related to the PPV1 sequence (NADL-2), maintaining the amino acid differences in positions 436 (S–P) and 565 (R–K). This study is the first to report the isolation of PPV in Argentina and the results suggest that PPV can cross the placenta even in vaccinated sows, thus affecting some of the fetuses and being able to cause fetal death in sows without reproductive failure. The results also suggest that vaccination only reduces clinical signs and reproductive disorders and may thus not be a perfect tool to manage PPV infection. This study provides information that needs to be studied in depth to improve strategies to prevent and control PPV infection in swine farms.

Concentraciones-tiempo de oxitetraciclina administradas en dos formas farmacéuticas a colonias de Apis mellifera a campo

2020-02-10T04:07:26Z

Objeto de conferencia XVII Jornadas de Divulgación Técnico-Científicas, IV Jornada Latinoamericana, II Jornadas de Ciencia y Tecnología y I Reunión Transdisciplinaria en Ciencias Agropecuarias (Universidad Nacional de Rosario, Casilda y Zavalla, 22 y 23 de septiembre de 2016) La loque americana es la enfermedad bacteriana más importante que afecta a las larvas de abejas. Su agente etiológico es Paenibacillus larvae, una bacteria esporulada. Esta característica complejiza las estrategias de control a campo. La oxitetraciclina es el único antibiótico aprobado para el control de la loque americana en Argentina. El objetivo del trabajo fue determinar las concentraciones-tiempo de oxitetraciclina, administrada en dos formas farmacéuticas en colonias de Apis mellifera a campo. Se utilizaron 9 colonias estándar (tipo Langstroth) de abeja melífera italiana (A. mellifera ligústica., L).

Aislamiento y caracterización molecular de parvovirus porcino en Argentina

2020-10-31T04:08:25Z

Objeto de conferencia XII Congreso Argentino de Virología, V Simposio de Virología Clínica y III Simposio de Virología Veterinaria (Buenos Aires, 26 al 28 de septiembre de 2017) El Parvovirus porcino (PPV) pertenece a la familia Parvoviridae y es de genoma ADN de cadena simple. Está ampliamente distribuido en la población porcina de cerdos domésticos y salvajes, y es la causa infecciosa más importante asociado a fallas reproductivas. Varios trabajos han reportado la variación genética del PPV demostrando que cepas de campo son genéticamente diferentes a las cepas de referencias y/o vacunales. En la Argentina las fallas reproductivas causadas por el virus siguen causando problema con menor número de nacidos vivos y consecuentes pérdidas económicas. Los objetivos de este trabajo fueron identificar la presencia de PPV en fetos de una granja porcina con sanidad controlada, realizar el primer aislamiento en cultivo celular y posteriormente analizar la variabilidad genética de las cepas aisladas. Se recolectaron 131 fetos y/o momias de una granja porcina de cría intensiva ubicada en la provincia de Santa Fe.

Estudio comparativo entre cepas del virus de la pseudorrabia aisladas en el país y de referencia mediante pruebas físico-químicas, electroforesis en SDS-PAGE y patrones de restricción del ADN

2020-10-31T04:08:36Z

Tesis de doctorado Comparative studies between Argentine and reference Pseudorabies virus strains using physicochemical methods, SDS- PAGE and DNA restriction patterns Nosetto, Edgardo Omar; Oliva, Graciela A.; Basualdo Farjat, Juan Ángel; Fondevila, Norberto Doctor en Ciencias Veterinarias; Universidad Nacional de La Plata Desde que la Enfermedad de Aujeszky (EA) fue diagnosticada por primera vez en Argentina en 1978, fueron sucediéndose numerosos brotes en diferentes lugares del país. El objetivo de este trabajo fue comparar diferentes cepas del virus de la Pseudorrabia porcina. Para ello utilizamos 5 cepas argentinas (3 aisladas en nuestro laboratorio) y 4 de referencia internacional. Las mismas fueron caracterizadas mediante pruebas físico-químicas; sus proteínas comparadas por electroforesis en SDS-PAGE; los ADN caracterizados mediante el uso de 6 enzimas de restricción y su antigenicidad fue comparada al evaluar los 9 antisueros producidos en ratas mediante un sistema de virus neutralización cruzada. Las pruebas físico-químicas permitieron observar pequeñas diferencias de comportamiento de las cepas virales frente a diferentes variables tales como pH, calor, acción de la tripsina, éter y cloroformo, las que en ningún caso aportan datos concluyentes que permitan observar diferencias significativas. El estudio de la movilidad de las proteínas estructurales de los virus en geles de poliacñlamida tampoco arrojó datos de importancia y resultó insuficiente para distinguirlos. El uso de la virus neutralización cruzada para estudiar su antigenicidad, en cambio, mostró resultados que permitieron comprobar que las cepas argentinas produjeron títulos neutralizantes más elevados que las extranjeras. Los patrones de restricción del ADN de las 9 cepas permitieron diferenciar grupos genómicos y establecer relación entre ellos al utilizar la enzima fíamHI. Así, pudieron establecerse, de acuerdo a la clasificación de Herrmann, que 4 cepas argentinas pertenecen al tipo genómico I y solo una pertenece al tipo genómico II. Esta cepa (Mer) fue aislada de animales provenientes de los Países Bajos, donde predomina ese tipo genómico, no habiéndose encontrado nuevamente en el país. Los patrones de restricción del ADN, por lo tanto, brindaron el mejor método para caracterizar cepas de EA.; Since Aujeszky's Disease was first recognized in Argentina in 1978, many outbreaks occurred in different places in our country. Nine Pseudorabies virus strains, 5 Argentine -3 of them isolated in our laboratory- and 4 reference ones, were characterized by physicochemical, SDS-PAGE, DNA restriction patterns and virus neutralization methods. Using trypsin, heat, ether, chloroform and pH in physicochemical analysis, only small differences were observed, as well as when the viral structural proteins were compared by SDS-PAGE. Cross virus neutralization test using 9 antisera produced in rats, showed that Argentine Pseudorabies virus strains elicited higher antibodies titres than those obtained with reference ones. Although 4 Argentine isolates were classified into type I of BamHl cleavage pattern, one isolate, Mer, belonged to type II, according to the classification by Herrmann. Since this type II virus was first isolated in 1981, no outbreak of Aujeszky’s Disease infection by this type has so far been reported in Argentina. Restriction endonuclease analysis of Aujeszky’s Disease Virus genome is choosen to differentiate isolates which could not been differentiate by other techniques. Tesis digitalizada en SEDICI.

Expression of M Protein from LP02/C Equine Arteritis Virus Inhibits Growth of Escherichia Coli M15-pQE30 System

2020-10-31T04:08:39Z

Articulo Virology: Research & Reviews; vol. 1, no. 2 Our objective was to obtain Equine Arteritis Virus M protein in prokaryotic system to test it as immunogen. LP02/C Equine Arteritis Virus cDNA was used as template to obtain and clone this protein. Equine Arteritis M protein was cloned in the expression vector pQE30 and the recombinant plasmid pQE30/M was transformed in Escherichia Coli M15 cells. The OD600 values of the IPTG-induced M15-pQE30/M culture showed an inhibition of the kinetics growth compared with the non-induced M15-pQE30/M and positive M15-pQE40/DHFR cultures. Several factors such as growth temperature, IPTG concentration and different inductors were analyzed but any of them showed an improvement in protein expression. Instead of E. coli M15strain, a new strain (E. coli BL21) was used and transformed with the pQE30/M. This resolved in part the growth inhibition observed in E. coli M15 cells, but no the recovery yield of the protein. So, as all gene products that affect cells kinetics growth are considered to be toxic, we argue that the lower yields in M protein recovery could be attributed to an associated toxicity of EAV-M protein from LP02/C strain in this expression system.

Equine arteritis virus cytopathic effect: caspase-dependent cell death as the major consequence observed

2020-10-31T04:08:45Z

Comunicacion Journal of Microbiology & Experimentation; vol. 6, no. 4 Equine arteritis virus infection in horse populations could be confirmed by the OIE recommended Virus Neutralization (VN) test and by the gold standard Virus Isolation (VI). These two techniques involve the observation of the cytopathic effect (CPE) of EAV. The characteristic CPE in EAV infections is the cellular lysis. The presence/absence of this CPE in cells in the VI/VN respectively, indicate the positivity of each test. CPE refers to morphological and molecular changes that where evidence in infect cells after viral infections. Most viral infections eventually result in the death of the host cell by different cellular mechanisms. The causes of death include cell lysis by alterations to the cell’s surface membrane and by various modes of programmed cell death such as necrosis, apoptosis, autophagy and others. EAV CPE is always refers as cellular lysis but the mechanism involve in this lytical effect has never specifically determined. So, our objective is to extend the concept of the cytopathic effect of EAV infections. To study the effect of different cell death mechanism in EAV CPE we used different inhibitors. Consequently, we concluded that the most important mechanism of cell death in EAV infections is caspase-dependent cell death.

Pensemos en mejorar nuestra producción

2020-07-15T21:19:05Z

Articulo Contacto Rural; no. 1 (2015) Comienza el año y como suele suceder nos encuentra trabajando en las tareas cotidianas. Seguramente cuando terminó el año anterior pensamos en todo lo que deberíamos planificar para que el próximo año sea mejor. Más producción, terneros, lechones, leche, quesos, pollos y huevos. Y como de esto se trata desde la Facultad de Ciencias Veterinaria nos incorporamos a participar también en este espacio de comunicación para todos. Somos un grupo de médicos veterinarios que trabaja en el territorio, colaborando con productores familiares que se esfuerzan todos los días por mejorar. Recorremos los partidos de Magdalena, Punta Indio, Brandsen, San Vicente y Cañuelas.

Síndrome de despoblamiento de colmenas: estudio de caso en la provincia de Buenos Aires

2020-07-30T20:07:33Z

Objeto de conferencia IV Congreso Internacional Científico y Tecnológico de la provincia de Buenos Aires (CONCYT) (Bernal, 1º de septiembre de 2017) Las abejas melíferas (Apis mellifera) cumplen un rol importante como polinizadores de diversos cultivos y contribuyen con los ecosistemas, su disminución amenaza a la polinización tanto de plantas silvestres como cultivadas, poniendo en peligro la biodiversidad, el alimento y la producción agrícola (Simon-Delso et al. 2014). El Síndrome de despoblamiento de colmenas (SDC) es un fenómeno que afecta a las poblaciones de abejas y que se caracteriza por la pérdida masiva de sus colonias, en especial durante la temporada invernal (van Engelsdorp et al., 2009). En 2017 se registró un posible caso de SDC en el que 170 colmenas pertenecientes al partido de General Alvear, provincia de Buenos Aires, nucleadas en 3 colmenares, habían sufrido la pérdida masiva de sus abejas. El objetivo del presente trabajo fue determinar las posibles causas de dicho episodio a partir del estudio de presencia de patógenos en esas colmenas.

Dicistroviridae: A new viral purification technique

2020-07-30T20:08:42Z

Comunicacion Dicistroviridae: una nueva técnica de purificación viral Revista Argentina de Microbiología; vol. 49, no. 4 The family Dicistroviridae comprises three genera and about twenty species of RNA virus, most of them with health or agricultural importance. The Triatoma virus (TrV) is the only entomopathogenic virus identified in triatomine bugs up to the present. TrV replicates within the intestinal epithelial cells, causing high mortality rate and delayed development of the molt of these bugs. TrV has been proposed as a biological control agent for vectors of Chagas disease. Viral particles were purified from feces of 1, 5 and 10 insects from an experimental colony of Triatoma infestans infected with TrV. Viral concentration and infectivity were corroborated using polyacrylamide gels and RT-PCR, respectively. In this work we report a method of viral purification that allows to reduce necessary reagents and time, using a very small amount of fecal matter.; La familia Dicistroviridae está compuesta por tres géneros y casi una veintena de especies de virus ARN, la mayoría de ellas de importancia sanitaria o agrícola. Triatoma virus (TrV) es el único virus entomopatógeno identificado en triatominos hasta el momento. El TrV se replica en las células del epitelio intestinal; ello provoca una alta tasa de mortalidad y retraso en el desarrollo de la muda del insecto. Se ha propuesto la utilización de TrV como agente de control biológico para vectores de la enfermedad de Chagas. Las partículas virales fueron purificadas a partir de materia fecal de 1, 5 y 10 insectos obtenidos de una colonia experimental infectada con TrV de Triatoma infestans y se corroboró su concentración viral e infectividad mediante geles de poliacrilamida y RT-PCR, respectivamente. En este trabajo se reporta unmétodo de purificación viral que permite la reducción de los reactivos y del tiempo necesariopara lograr dicha purificación, partiendo de una mínima cantidad de materia fecal.

Interferencia del Herpesvirus equino 1 (EHV-1) en la apoptosis inducida

2020-10-31T04:09:31Z

Articulo Interference Equine herpesvirus 1 (EHV-1) induced apoptosis InVet; vol. 15, no. 2 La apoptosis es un tipo de muerte celular programada que puede ser desencadenada por múltiples factores, tanto internos como externos; dentro de estos últimos se encuentran las infecciones virales. Algunos alphaherpesvirus han desarrollado diversas estrategias para retardar o inhibir la muerte celular obteniendo, de esta manera, su propio beneficio al poder permanecer durante más tiempo en la célula. Hasta el momento no se ha identificado ningún mecanismo relacionado con la modulación de la muerte celular durante la infección con Herpesvirus equino tipo 1 (EHV-1). El objetivo del presente trabajo fue describir el efecto producido por la infección con EHV-1 sobre cultivos celulares inducidos a la muerte por apoptosis. La evaluación de la apoptosis se realizó mediante el reconocimiento de la fragmentación en escalera del ADN, la evaluación de la relación Anexina V/ioduro de propidio (IP) y la determinación del clivaje de la citoqueratina 18, utilizando técnicas de inmunofluorescencia. Los resultados indican una posible interferencia del EHV-1 con la muerte por apoptosis hacia la mitad de su ciclo de replicación, que se incrementa hacia el final del mismo.; Apoptosis is a programmed cell death that can be triggered by many factors, both internal and external. Viral infections are included among the latter. Some alphaherpesvirus have developed several strategies to retard or inhibit cell death and thus the virus benefits itself by staying longer in the cell. So far, no mechanisms have been identified related to modulation of cell death during infection with equine herpesvirus type 1 (EHV-1). The aim of the present study was to describe the effect produced by the infection with EHV-1 on apoptosis-induced cell cultures. Assessment of apoptosis was performed by DNA laddering, the Annexin V/propidium iodide (PI) determination and the cytokeratin 18 cleavage analysis using immunofluorescence techniques. Results indicate a possible interference of EHV-1 with apoptotic cell death in the middle of its replication cycle, being increased by its end.

Características biológicas de cepas de Herpesvirus bovino 1 y 5 utilizando el modelo experimental conejo

2020-10-31T04:09:27Z

Articulo Biological characteristics of Bovine Herpesvirus 1 and 5 strains using the rabbit experimental model InVet; vol. 14, no. 1 Los Herpesvirus bovinos (BoHV) pueden infectar tanto a mustélidos como a conejos y esta última especie ha sido utilizada como modelo de laboratorio para la infección por BoHV-1 y 5. El objetivo de este trabajo fue estudiar la patogenicidad de diferentes cepas argentinas de BoHV-1 y BoHV-5 utilizando el modelo experimental conejo. Se utilizaron conejos de raza neozelandesa que se inocularon por vía intranasal e intravaginal. Los animales inoculados por vía intranasal con cepas de BoHV-5 desarrollaron signos nerviosos en el 83% de los casos, mientras que BoHV-1.1 causó signos nerviosos en el 57% de los animales y BoHV-1.2 no provocó signos clínicos evidentes. El BoHV-5 causó síntomas nerviosos solo en los animales jóvenes mientras que BoHV-1 solo lo hizo ocasionalmente y también en individuos jóvenes. Los conejos inoculados por vía intravaginal no mostraron signos clínicos ni lesiones aparentes en los órganos estudiados; la infección se demostró por seroconversión serológica. El conejo resultó adecuado para estudiar la sintomatología y las lesiones producidas en los distintos órganos, fundamentalmente en el sistema nervioso central. El modelo resultó de utilidad por ser económico, de muy fácil manejo y permitió reconocer diferencias en el comportamiento biológico de las cepas de BoHV-1 y BoHV-5 estudiadas.; Bovine Herpesvirus (BoHV) can infect both rabbits and mustelids. Rabbit has been used as a laboratory model for infection with BoHV-1 and 5. The objective of this research was to study the pathogenicity of different Argentinian BoHV-1 and BoHV-5 strains by using the rabbit experimental model. New Zealand rabbits were inoculated by intranasal and intravaginal ways. The animals inoculated intranasally with strains of BoHV-5 developed neurological signs in 83% of the cases. BoHV-1.1 caused neurological signs in 57% of the animals and BoHV-1.2 did not cause clear clinical signs. BoHV-5 caused nervous signs in young animals while BoHV-1 did so occasionally in young rabbits. Animals inoculated intravaginally showed no apparent clinical signs or apparent lesions in the studied organs. The infection was demonstrated by serological seroconversion. The rabbit was appropriate to study the clinical signs and the lesions produced in the different organs, primarily in the central nervous system. The model was useful for being inexpensive and very easy to use, and it enabled to identify differences in the biological behavior of the studied BoHV-1 and BoHV-5 strains.

Complete genome amplification of Equine influenza virus subtype 2

2020-10-31T04:09:22Z

Comunicacion Amplificación del genoma completo del subtipo 2 del virus de la influenza equina Revista Argentina de Microbiología; vol. 41 This work reports a method for rapid amplification of the complete genome of equine influenza virus subtype 2 (H3N8). A ThermoScriptTM reverse transcriptase instead of the avian myeloblastosis virus reverse transcriptase or Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase was used. This enzyme has demonstrated higher thermal stability and is described as suitable to make long cDNA with a complex secondary structure. The product obtained by this method can be cloned, used in later sequencing reactions or nested-PCR with the purpose of achieving a rapid diagnosis and characterization of the equine influenza virus type A. This detection assay might be a valuable tool for diagnosis and screening of field samples as well as for conducting molecular studies.; En este trabajo comunicamos un método rápido que permite la amplificación del genoma completo del subtipo 2 (H3N8) del virus de la influenza equina. Se utilizó la enzima transcriptasa reversa ThermoScriptTM en lugar de la transcriptasa reversa del virus de la mieloblastosis aviar o la transcriptasa reversa del virus de la leucemia murina de Moloney. Esta enzima ha demostrado tener una alta estabilidad térmica y la capacidad de hacer largas copias de ADN con una estructura secundaria compleja. El producto obtenido por esta técnica puede ser clonado y utilizado posteriormente en reacciones de secuenciación o de PCR anidada con la finalidad de lograr un diagnóstico rápido y la caracterización del virus de la influenza equina tipo A. Este ensayo de detección puede llegar a ser una valiosa herramienta para el diagnóstico y el análisis de muestras de campo, así como para la realización de estudios moleculares.

Respuesta inmune local en la patogenia del aborto inducido por herpesvirus equino 1

2020-10-31T04:09:16Z

Tesis de doctorado Galosi, Cecilia Mónica; Zanuzzi, Carolina Natalia; Dolcini, Guillermina; Monteavaro, Cristina Esther; Rambeaud, Magdalena Doctor en Ciencias Veterinarias; Universidad Nacional de La Plata El alfaherpesvirus equino 1 produce alteraciones reproductivas que ocasionan importantes pérdidas económicas, además de las que suceden a nivel respiratorio y nervioso. En esta tesis se utilizó el modelo murino BALB/c para estudiar algunos cambios en el útero y las placentas de ratonas preñadas y experimentalmente infectadas que pudieran producir la pérdida de continuidad del conceptus. Se describieron las lesiones en los pulmones, el útero y las placentas y se estudiaron los cambios vasculares y en la proliferación y muerte celular por inmunohistoquímica. Se analizaron los niveles en la expresión de algunas citoquinas por qPCR, citometría de flujo y por ELISA. Las ratonas infectadas manifestaron signos clínicos respiratorios y en sus pulmones lesiones histopatológicas típicas, con aislamiento viral y detección de ADN positivos. En las placentas infectadas el aislamiento viral y detección de ADN fueron negativos. Sin embargo, presentaron congestión vascular, ocasionales trombos en pequeños vasos de las capas de espongiotrofoblasto y decidua, aumento en el área del laberinto, y reducción significativa en el endotelio capilar fetal. También se redujo significativamente la proliferación celular, mientras que la apoptosis fue significativamente mayor. La regulación local de la expresión de IL-10, TNF-α, IFN-γ, Foxp3 e IL-4 también difirió en el útero y las placentas del grupo infectado con respecto al control. Hubo un fuerte incremento de la respuesta Th1, mayormente representado por IFN-γ, acompañada por una respuesta Th2 tolerogénica, cuyo fin podría ser restaurar el balance homeostático ante la infección. Los datos obtenidos permiten afirmar que se producen cambios celulares y moleculares a nivel de la respuesta inmune local debido a la infección. La comprensión del impacto inmunológico de la infección sistémica y local por el virus en el modelo murino ayudará a abordar estudios en equinos para mejorar las estrategias profilácticas y terapéuticas.

Desarrollo de procesos biotecnológicos para la producción heteróloga de proteínas del virus de la rabia para su uso en medicina veterinaria

2020-10-31T04:09:19Z

Tesis de doctorado Pecoraro, Marcelo R.; Rodríguez, María E.; Claus, Juan; Mórtola, Eduardo Carlos Doctor en Ciencias Veterinarias; Universidad Nacional de La Plata El virus de la rabia causa una forma letal de encefalomielitis tanto en seres humanos como en animales. El control de la rabia canina, mediante programas de vacunación masiva y eliminación de los perros callejeros, puede reducir la incidencia de la rabia en humanos. En Argentina, las campañas de vacunación utilizan vacunas producidas en cerebro de ratones lactantes, pero la producción de estas vacunas involucra la manipulación del virus activo y es costosa; además, ha sido desaconsejada por la Organización Mundial de la Salud. Debido a que la rabia afecta, principalmente, países en desarrollo, es necesaria una solución económica. En este contexto, se estudió la producción recombinante de las proteínas más inmunogénicas del virus de la rabia: la glicoproteína y la nucleoproteína, en bacterias y levaduras, como alternativa al método actual de producción. Estos sistemas de expresión fueron seleccionados debido a las ventajas técnicas que presentan: fácil manipulación, altos niveles de expresión de proteínas y relativa sencillez para escalar. Los resultados encontrados indican que las proteínas recombinantes obtenidas se expresaron y purificaron de manera sencilla, pudiendo ser usadas como fuente segura de antígeno en la producción de una vacuna a subunidades, para la prevención de la enfermedad. La inmunogenicidad de las proteínas recombinantes fue evaluada mediante el ensayo de potencia del NIH, pero no se logró generar protección en los ratones. Sin embargo, las proteínas recombinantes fueron capaces de producir anticuerpos específicos contra las proteínas nativas del virus, aunque en un título menor al necesario para generar protección ante un desafío viral. Estos resultados son alentadores con vistas al futuro, debido a que mediante nuevos estudios, incrementando las concentraciones de antígenos y utilizando otros adyuvantes, sería posible alcanzar títulos de anticuerpos específicos a la rabia capaces de producir protección ante un desafío viral. Tesis dirigida por los Dres. Marcelo Ricardo Ítalo Pecoraro y Sebastián Fernando Cavalitto.