Aplicación del Dot Blot como método alternativo para el diagnóstico serológico de la infección por el virus de la lengua azul

Abstract

La lengua azul es una enfermedad infecciosa viral causada por el virus de la lengua azul (VLA), un Orbivirus transmitido principalmente por dípteros del género Culicoides, que afecta a rumiantes domésticos y silvestres y reviste relevancia sanitaria y económica a nivel mundial. Aunque la enfermedad clínica grave se observa con mayor frecuencia en ovinos, la infección en bovinos desempeña un papel clave en la epidemiología como reservorio y centinela, lo que subraya la importancia de herramientas serológicas confiables para la vigilancia. En Argentina, las limitaciones operativas y económicas de algunas técnicas diagnósticas disponibles justifican la búsqueda de métodos alternativos, rápidos y de bajo costo que puedan aplicarse como pruebas de cribado. El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar la utilidad del Dot Blot como método alternativo para el diagnóstico serológico de la infección por VLA. Para ello, se empleó un panel de 10 sueros bovinos control positivos y negativos provenientes de INTA Castelar. Se estandarizó un Dot Blot indirecto utilizando dos antígenos: un antígeno nativo comercial y la proteína recombinante no estructural NS1 (rNS1) expresada en sistema baculovirus. Se evaluaron distintas concentraciones antigénicas (2, 3 y 4 μL) y diluciones séricas (1:25, 1:50 y 1:100), así como la capacidad de detección en sueros individuales y en pools 1/4 y 1/8. Los resultados demostraron que la concentración de 2 μL de antígeno y la dilución sérica 1:50 fueron los adecuados. Ambos antígenos mostraron concordancia total con el panel control, sin observarse diferencias en el desempeño diagnóstico entre el antígeno nativo y la rNS1. En el análisis de pools, la dilución 1/4 permitió detectar reactividad positiva, mientras que en 1/8 no se evidenció señal. Nuestros hallazgos indican que el Dot Blot estandarizado constituye una técnica sencilla, de bajo requerimiento tecnológico y con adecuada concordancia frente a sueros control, lo que respalda su potencial aplicación como prueba de cribado en programas de vigilancia serológica de lengua azul en Argentina. Si bien los resultados son preliminares y requieren validación con un mayor número de muestras para estimar parámetros diagnósticos robustos (sensibilidad y especificidad diagnósticas), la metodología evaluada ofrece una alternativa prometedora para complementar las técnicas moleculares de referencia, particularmente en contextos donde los recursos son limitados y se requiere una respuesta diagnóstica ágil.