http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/198749 Fri, 13 Nov 2026 22:25:07 GMT 2026-11-13T22:25:07Z http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200444 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 INTRODUCTION: Intra- and extracellular pH regulation is a key function of all cells and tissues and a prerequisite for normal physiological function. Spatial nonuniformity of intracellular pH is generated due to differential subcellular distribution of Na⁺/H⁺ exchanger (NHE1) and the Na⁺/HCO₃⁻ cotransporter (NBC). AIM: To study proton microdomains we generated a proton sensor fluorescent protein (pHluorin2) fused with canonical targeting signals to the endoplasmic reticulum, mitochondrial matrix and junctional cleft of cardiac myocytes (cleft-targeted pH sensor were generated by fusing pHluorin2 to FKBP12.6). METHODS AND RESULTS: We initially corroborated the localization of the sensor in HEK cells with confocal microscopy. We used the ammonia-prepulse technique to create an intracellular acid load. pH recoveries were obtained from cytosol and endoplasmic reticulum lumen. NHE inhibition by amiloride drastically reduced the pH recovery suggesting the presence of NHE in reticulum (A.U. cito: 0.144±0.004, n=24; cito+amiloride: 0.066±0.005*, n=23; ER: 0.098±0.005 n=24; ER+amiloride: 0.011±0.005*, n=24; *p&lt;0.05). Cytosolic, mitochondrial, and endoplasmic pH decreased during cytosolic Ca²⁺ elevation trigger by histamine (A.U. Cito: -0.70±0.03, n=5; ER: -0.43±0.028, n=5; Mito: -0.63±0.03, n=5). Next, we generated a cardiotropic adeno-associated virus (AAV9) to express the pH sensors into cardiac ventricular myocytes. AAV9-pHluorin2 and AAV9-pHluorin2-FKBP were injected in 3 months rats, after 28 days cardiac myocytes were isolated and pH sensors expression were corroborated by confocal microscopy. pHluorin2-FKBP12.6 express in a striated pattern with intensity maxima spaced ~2 μm apart, this strongly supports the conclusion that the FKBP12.6-tagged sensors are targeted to cardiac ryanodine receptor (RyR) at the zline. DISCUSSION: Proton dynamics in cardiac cells are poorly understood. Thus, it is important to highlight that herein we generated for the first time a fluorescent pH sensor targeting different cellular microdomains as a tool for proton microdomains studies. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200444 2022-01-01T00:00:00Z INTRODUCTION: Intra- and extracellular pH regulation is a key function of all cells and tissues and a prerequisite for normal physiological function. Spatial nonuniformity of intracellular pH is generated due to differential subcellular distribution of Na⁺/H⁺ exchanger (NHE1) and the Na⁺/HCO₃⁻ cotransporter (NBC). AIM: To study proton microdomains we generated a proton sensor fluorescent protein (pHluorin2) fused with canonical targeting signals to the endoplasmic reticulum, mitochondrial matrix and junctional cleft of cardiac myocytes (cleft-targeted pH sensor were generated by fusing pHluorin2 to FKBP12.6). METHODS AND RESULTS: We initially corroborated the localization of the sensor in HEK cells with confocal microscopy. We used the ammonia-prepulse technique to create an intracellular acid load. pH recoveries were obtained from cytosol and endoplasmic reticulum lumen. NHE inhibition by amiloride drastically reduced the pH recovery suggesting the presence of NHE in reticulum (A.U. cito: 0.144±0.004, n=24; cito+amiloride: 0.066±0.005*, n=23; ER: 0.098±0.005 n=24; ER+amiloride: 0.011±0.005*, n=24; *p&lt;0.05). Cytosolic, mitochondrial, and endoplasmic pH decreased during cytosolic Ca²⁺ elevation trigger by histamine (A.U. Cito: -0.70±0.03, n=5; ER: -0.43±0.028, n=5; Mito: -0.63±0.03, n=5). Next, we generated a cardiotropic adeno-associated virus (AAV9) to express the pH sensors into cardiac ventricular myocytes. AAV9-pHluorin2 and AAV9-pHluorin2-FKBP were injected in 3 months rats, after 28 days cardiac myocytes were isolated and pH sensors expression were corroborated by confocal microscopy. pHluorin2-FKBP12.6 express in a striated pattern with intensity maxima spaced ~2 μm apart, this strongly supports the conclusion that the FKBP12.6-tagged sensors are targeted to cardiac ryanodine receptor (RyR) at the zline. DISCUSSION: Proton dynamics in cardiac cells are poorly understood. Thus, it is important to highlight that herein we generated for the first time a fluorescent pH sensor targeting different cellular microdomains as a tool for proton microdomains studies. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200443 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Bradyrhizobium diazoefficiens es una bacteria del suelo con un estilo de vida dual, pudiendo encontrarse en estado de vida libre, ya sea en forma planctónica o constituyendo un biofilm, o estableciendo interacciones simbióticas con su par simbiótico, la planta de soja. Durante esta interacción, la bacteria es capaz de invadir las raíces de la planta dentro de las cuales se diferencia a bacteroide, forma en la cual es capaz de captar el nitrógeno atmosférico y reducirlo a amonio. Esta capacidad ha hecho que estas bacterias sean utilizadas como herramienta biotecnológica para producir inoculantes para el cultivo de soja. En ambos estados, ya sea vida libre o durante su interacción simbiótica, los microorganismos deben interaccionar con una superficie, comenzando por su reconocimiento y seguido por un proceso de adhesión, que puede involucrar diversos componentes bacterianos superficiales, como adhesinas, exopolisacáridos (EPS) y lipopolisacáridos (LPS), entre otros. Si bien el proceso de adhesión de B. diazoefficiens ha sido estudiado en varios aspectos, se han realizado pocos estudios genéticos para identificar los mecanismos involucrados. Anteriormente, hemos caracterizado un pequeño grupo de genes relacionados con un pili tipo tad (o pili tipo IVc), con funciones relacionadas a adhesión a raíces, pero no en la interacción con superficies abióticas. En ese estudio, otros dos cúmulos de genes fueron identificados mediante herramientas bioinformáticas, pero no fueron caracterizados experimentalmente. Con el objetivo de ampliar el estudio, en este trabajo realizamos una asignación funcional de cada gen presente en estos cúmulos mediante similitud de secuencia con otros pili bacterianos conocidos. Así, encontramos que cada cúmulo codifica las funciones necesarias para sintetizar un pili completo. Además, identificamos un nuevo cúmulo compuesto por un menor número de genes que podría codificar parcialmente algunas funciones repetidas. También encontramos otros genes aislados en el cromosoma que podrían codificar para pilinas, las subunidades proteicas que forman el filamento del pili. Para probar la funcionalidad de estas estructuras, obtuvimos un mutante mediante una deleción cromosomal limpia de uno de los cúmulos, que incluye 6 de los 10 genes e iniciamos su caracterización fenotípica. Este mutante muestra una alteración en la formación de biofilm que depende del medio de cultivo y de la superficie de adhesión ensayada. Además, su capacidad para moverse nadando en un medio semisólido se vio alterada, en comparación con la cepa salvaje. Más estudios serán necesarios para determinar el rol de este cúmulo de genes en relación con la adhesión a la raíz, así como su comportamiento durante el establecimiento de la simbiosis fijadora de nitrógeno. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200443 2022-01-01T00:00:00Z Bradyrhizobium diazoefficiens es una bacteria del suelo con un estilo de vida dual, pudiendo encontrarse en estado de vida libre, ya sea en forma planctónica o constituyendo un biofilm, o estableciendo interacciones simbióticas con su par simbiótico, la planta de soja. Durante esta interacción, la bacteria es capaz de invadir las raíces de la planta dentro de las cuales se diferencia a bacteroide, forma en la cual es capaz de captar el nitrógeno atmosférico y reducirlo a amonio. Esta capacidad ha hecho que estas bacterias sean utilizadas como herramienta biotecnológica para producir inoculantes para el cultivo de soja. En ambos estados, ya sea vida libre o durante su interacción simbiótica, los microorganismos deben interaccionar con una superficie, comenzando por su reconocimiento y seguido por un proceso de adhesión, que puede involucrar diversos componentes bacterianos superficiales, como adhesinas, exopolisacáridos (EPS) y lipopolisacáridos (LPS), entre otros. Si bien el proceso de adhesión de B. diazoefficiens ha sido estudiado en varios aspectos, se han realizado pocos estudios genéticos para identificar los mecanismos involucrados. Anteriormente, hemos caracterizado un pequeño grupo de genes relacionados con un pili tipo tad (o pili tipo IVc), con funciones relacionadas a adhesión a raíces, pero no en la interacción con superficies abióticas. En ese estudio, otros dos cúmulos de genes fueron identificados mediante herramientas bioinformáticas, pero no fueron caracterizados experimentalmente. Con el objetivo de ampliar el estudio, en este trabajo realizamos una asignación funcional de cada gen presente en estos cúmulos mediante similitud de secuencia con otros pili bacterianos conocidos. Así, encontramos que cada cúmulo codifica las funciones necesarias para sintetizar un pili completo. Además, identificamos un nuevo cúmulo compuesto por un menor número de genes que podría codificar parcialmente algunas funciones repetidas. También encontramos otros genes aislados en el cromosoma que podrían codificar para pilinas, las subunidades proteicas que forman el filamento del pili. Para probar la funcionalidad de estas estructuras, obtuvimos un mutante mediante una deleción cromosomal limpia de uno de los cúmulos, que incluye 6 de los 10 genes e iniciamos su caracterización fenotípica. Este mutante muestra una alteración en la formación de biofilm que depende del medio de cultivo y de la superficie de adhesión ensayada. Además, su capacidad para moverse nadando en un medio semisólido se vio alterada, en comparación con la cepa salvaje. Más estudios serán necesarios para determinar el rol de este cúmulo de genes en relación con la adhesión a la raíz, así como su comportamiento durante el establecimiento de la simbiosis fijadora de nitrógeno. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200440 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Previamente hemos visto que ratas y ratones machos, después de una dieta rica en fructosa (FRD), mostraron intolerancia a la glucosa (IGT), resistencia a la insulina (RI) y defectos cardíacos, como hipertrofia, disfunción sistólica y arritmias. En el presente trabajo pretendemos identificar los efectos de la misma dieta en hembras de rata y ratón. Se utilizaron ratas y ratones Wistar hembra, alimentados con FRD o dieta control (CD) durante 21 días. Los parámetros morfométricos no mostraron diferencia en peso corporal, grasa abdominal o retroperitoneal (normalizados por peso corporal, CW, o longitud tibial, LT). Sin embargo, el peso del corazón normalizado mostró un aumento significativo en los ratones FRD vs CD (p:0.05/PC o 0.03/LT). El análisis bioquímico mostró que las ratas FRD no presentaban RI (índice de glucemia/triglicéridos) ni alteración de la prueba de tolerancia intraperitoneal a la glucosa con respecto a los animales CD. Por ecocardiografía, solo el diámetro del tabique interventricular en diástole y sístole (p: 0,053 y 0,053), y la pared posterior en diástole y sístole (p. 0,022 y 0,030), fueron significativamente diferentes, indicando una hipertrofia cardíaca en animales FRD vs CD . No hubo una diferencia significativa en el acortamiento fraccional, aunque hubo una marcada tendencia a la disminución en la relación E/A, lo que puede indicar una alteración en la relajación ventricular en los ratones FRD vs CD. La FRD en hembras murinas, al contrario de los machos, no mostró IGT ni RI, aunque podemos observar hipertrofia cardiaca sin disfunción sistólica, indicando, quizás, una protección frente a dietas con exceso de hidratos de carbono, en edad reproductiva con respecto a los machos. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200440 2022-01-01T00:00:00Z Previamente hemos visto que ratas y ratones machos, después de una dieta rica en fructosa (FRD), mostraron intolerancia a la glucosa (IGT), resistencia a la insulina (RI) y defectos cardíacos, como hipertrofia, disfunción sistólica y arritmias. En el presente trabajo pretendemos identificar los efectos de la misma dieta en hembras de rata y ratón. Se utilizaron ratas y ratones Wistar hembra, alimentados con FRD o dieta control (CD) durante 21 días. Los parámetros morfométricos no mostraron diferencia en peso corporal, grasa abdominal o retroperitoneal (normalizados por peso corporal, CW, o longitud tibial, LT). Sin embargo, el peso del corazón normalizado mostró un aumento significativo en los ratones FRD vs CD (p:0.05/PC o 0.03/LT). El análisis bioquímico mostró que las ratas FRD no presentaban RI (índice de glucemia/triglicéridos) ni alteración de la prueba de tolerancia intraperitoneal a la glucosa con respecto a los animales CD. Por ecocardiografía, solo el diámetro del tabique interventricular en diástole y sístole (p: 0,053 y 0,053), y la pared posterior en diástole y sístole (p. 0,022 y 0,030), fueron significativamente diferentes, indicando una hipertrofia cardíaca en animales FRD vs CD . No hubo una diferencia significativa en el acortamiento fraccional, aunque hubo una marcada tendencia a la disminución en la relación E/A, lo que puede indicar una alteración en la relajación ventricular en los ratones FRD vs CD. La FRD en hembras murinas, al contrario de los machos, no mostró IGT ni RI, aunque podemos observar hipertrofia cardiaca sin disfunción sistólica, indicando, quizás, una protección frente a dietas con exceso de hidratos de carbono, en edad reproductiva con respecto a los machos. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200433 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Encephalopsin (OPN3) is part of the opsin family of light-sensitive G-protein coupled receptors. OPN3 was discovered in deep brain regions, specifically the arcuate nucleus and the paraventricular nucleus of the hypothalamus, however there have been limited research in the functionality of OPN3. Oancea lab has discovered that OPN3 functions in a light independent manner and signals through Gai to negatively regulate the melanogenic Gαs-coupled MC1R in human epidermal melanocytes. Neuronal melanocortin receptors (MC3R and MC4R) are found in the arcuate nucleus and paraventricular nucleus of the hypothalamus and play non-redundant roles in mediating energy balance. Both MC3R and MC4R share similar structural identities to MC1R and have been found to couple to Gαs. Additionally, Cone and his colleagues found that MC4R couples to Kir7.1 in hypothalamic neurons independent of Gprotein activity. Previous data in our lab has revealed that OPN3 colocalizes and forms a physical complex with MC4R. The goal of this study is to test the hypothesis that OPN3 functions to negatively modulate MC4R-mediated signaling. More specifically, we overexpress OPN3 and MC4R in HEK293 cells together with Kir7.1 and measured the potassium current at diferent potentials. We only observed a significant amount of current in cells coexpressing OPN3 and this effect seems to be occluded by MC4R addition. More experiments are required to fully understand the signaling cascade involved and what is the effect of MC4R agonists. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200433 2022-01-01T00:00:00Z Encephalopsin (OPN3) is part of the opsin family of light-sensitive G-protein coupled receptors. OPN3 was discovered in deep brain regions, specifically the arcuate nucleus and the paraventricular nucleus of the hypothalamus, however there have been limited research in the functionality of OPN3. Oancea lab has discovered that OPN3 functions in a light independent manner and signals through Gai to negatively regulate the melanogenic Gαs-coupled MC1R in human epidermal melanocytes. Neuronal melanocortin receptors (MC3R and MC4R) are found in the arcuate nucleus and paraventricular nucleus of the hypothalamus and play non-redundant roles in mediating energy balance. Both MC3R and MC4R share similar structural identities to MC1R and have been found to couple to Gαs. Additionally, Cone and his colleagues found that MC4R couples to Kir7.1 in hypothalamic neurons independent of Gprotein activity. Previous data in our lab has revealed that OPN3 colocalizes and forms a physical complex with MC4R. The goal of this study is to test the hypothesis that OPN3 functions to negatively modulate MC4R-mediated signaling. More specifically, we overexpress OPN3 and MC4R in HEK293 cells together with Kir7.1 and measured the potassium current at diferent potentials. We only observed a significant amount of current in cells coexpressing OPN3 and this effect seems to be occluded by MC4R addition. More experiments are required to fully understand the signaling cascade involved and what is the effect of MC4R agonists. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200429 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 La producción in vitro (PIV) de embriones es una biotecnología reproductiva que está en auge por su potencial en la producción ganadera, pero la calidad de los embriones producidos in vitro es inferior a los in vivo, manifestándose en alteraciones ultraestructurales, aumento de apoptosis, daño en el ADN, y detenimiento embrionario. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la suplementación con el antioxidante AAL (2,5 μM) en el cultivo in vitro (CIV) de embriones bovinos durante 24 h, sobre la velocidad de desarrollo, tasa y calidad de los blastocistos. Se utilizaron ovocitos de ovarios de frigorífico sometidos a las etapas de PIV (maduración, fertilización y CIV) en una atmósfera gaseada (5% CO₂; 39 °C; 7% O₂). Se evaluaron tasa de clivaje 48 h post fertilización, clasificando clivados de 2 a 4 células (2-4c) y de más de 4 células (>4c); blastocistos al día 7-8 (B7-B8) y blastocistos totales (BT). La tinción con Hoechst 33342 se empleó para estudiar el número total de células (NTC) por embrión en B8. Además, se evaluó la calidad de los B7 y B8 siguiendo la clasificación propuesta por la International Embryo Transfer Society (IETS). De un total de 508 embriones: 263 fueron evaluados para velocidad y tasa de desarrollo, 50 para conteo de NTC, y 195 se clasificaron según IETS. El modelo estadístico incluyó un enfoque bayesiano utilizando una distribución previa normal y no informativa para calcular los ICB del 95 %. Se consideró diferencia cuando p< 0,05 y tendencia cuando p<0,1. Los datos se analizaron con Software RStudio. Nuestros resultados indicaron que: a) no hubo diferencias en tasas de clivaje de 2-4c (p=0.37); b) hubo una tendencia en incrementar la tasa de clivaje >4c con AAL (p=0.10); c) la tasa de B7 fue AAL>Control (p=0.0027); d) no hubo diferencias en la tasa de B8 (p=0.22); e) la tasa de BT fue AAL>Control (p=0.01); f) el NTC fue AAL>Control (p=0.05); g) la calidad embrionaria fue AAL>Control (p=0.001). Los parámetros de tasa y calidad evaluados en los blastocistos se vieron incrementados con la suplementación con AAL al medio de CIV. El agregado de este antioxidante al medio de cultivo es una nueva herramienta para mejorar la performance de la PIV en bovinos. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200429 2022-01-01T00:00:00Z La producción in vitro (PIV) de embriones es una biotecnología reproductiva que está en auge por su potencial en la producción ganadera, pero la calidad de los embriones producidos in vitro es inferior a los in vivo, manifestándose en alteraciones ultraestructurales, aumento de apoptosis, daño en el ADN, y detenimiento embrionario. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la suplementación con el antioxidante AAL (2,5 μM) en el cultivo in vitro (CIV) de embriones bovinos durante 24 h, sobre la velocidad de desarrollo, tasa y calidad de los blastocistos. Se utilizaron ovocitos de ovarios de frigorífico sometidos a las etapas de PIV (maduración, fertilización y CIV) en una atmósfera gaseada (5% CO₂; 39 °C; 7% O₂). Se evaluaron tasa de clivaje 48 h post fertilización, clasificando clivados de 2 a 4 células (2-4c) y de más de 4 células (>4c); blastocistos al día 7-8 (B7-B8) y blastocistos totales (BT). La tinción con Hoechst 33342 se empleó para estudiar el número total de células (NTC) por embrión en B8. Además, se evaluó la calidad de los B7 y B8 siguiendo la clasificación propuesta por la International Embryo Transfer Society (IETS). De un total de 508 embriones: 263 fueron evaluados para velocidad y tasa de desarrollo, 50 para conteo de NTC, y 195 se clasificaron según IETS. El modelo estadístico incluyó un enfoque bayesiano utilizando una distribución previa normal y no informativa para calcular los ICB del 95 %. Se consideró diferencia cuando p< 0,05 y tendencia cuando p<0,1. Los datos se analizaron con Software RStudio. Nuestros resultados indicaron que: a) no hubo diferencias en tasas de clivaje de 2-4c (p=0.37); b) hubo una tendencia en incrementar la tasa de clivaje >4c con AAL (p=0.10); c) la tasa de B7 fue AAL>Control (p=0.0027); d) no hubo diferencias en la tasa de B8 (p=0.22); e) la tasa de BT fue AAL>Control (p=0.01); f) el NTC fue AAL>Control (p=0.05); g) la calidad embrionaria fue AAL>Control (p=0.001). Los parámetros de tasa y calidad evaluados en los blastocistos se vieron incrementados con la suplementación con AAL al medio de CIV. El agregado de este antioxidante al medio de cultivo es una nueva herramienta para mejorar la performance de la PIV en bovinos. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200425 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 En condiciones fisiológicas normales, la restauración de una barrera epidérmica funcional es eficaz; sin embargo, algunas patologías pueden interferir generando un defecto cutáneo ulcerativo crónico, una de las complicaciones reconocidas de la diabetes. La mayoría de estas úlceras venosas crónicas no cicatrizan con los tratamientos convencionales aprobados, generando infecciones y complicaciones en el paciente. Los tratamientos basados en el uso de células madre mesenquimales (CMM) autólogas han tenido éxito; sin embargo, su implementación conlleva complicaciones. La gelatina de Wharton de cordón umbilical ofrece una fuente ilimitada de CMM adultas (CMMcu) con las mismas características relevantes para la aplicabilidad clínica. El presente trabajo tiene como objetivo demostrar la seguridad, eficacia y potencial terapéutico del uso de CMMcu humanas y equinas en la cicatrización de heridas dérmicas crónicas. Para ello se realizaron una serie de ensayos in vitro e in vivo. En el co-cultivo de CMMcu y células mononucleares de sangre periférica (CMSP), se observó la inhibición de la proliferación de las CMSP, demostrando que las CMMcu tanto humanas como equinas son capaces de generar un entorno tolerogénico. Por otro lado, se llevaron a cabo trasplantes xenogénicos de las CMMcu en ratones inmunocompetentes, en los cuales se realizó una lesión dérmica y, en sus bordes, se inyectaron las CMMcu murinas, equinas y humanas. El análisis de la evolución de la lesión permitió demostrar que las CMMcu de las 3 especies mejoran la cicatrización de heridas y recuperación de la pilosidad. Además, el trasplante alogénico de las CMMcu y aún más el xenogénico, no generaron rechazo ni signos de inflamación. El HLA-G es un punto de control inmunitario (CI) que se expresa ampliamente en CMMcu humanas, tiene un ortólogo funcional Q2a en ratón y hallamos que los equinos tienen una proteína CI similar. Como es sabido, el HLAG y sus ortólogos generan una inhibición del sistema inmune local, lo cual podría explicar la aceptación al trasplante de CMMcu. De esta manera, las CMMcu podrían jugar un papel importante en medicina regenerativa, aportando una nueva y eficaz alternativa terapéutica, no solo en humanos con lesiones dérmicas crónicas, sino también en otras especies como los caballos, que presentan frecuentes lesiones cutáneas en las patas. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200425 2022-01-01T00:00:00Z En condiciones fisiológicas normales, la restauración de una barrera epidérmica funcional es eficaz; sin embargo, algunas patologías pueden interferir generando un defecto cutáneo ulcerativo crónico, una de las complicaciones reconocidas de la diabetes. La mayoría de estas úlceras venosas crónicas no cicatrizan con los tratamientos convencionales aprobados, generando infecciones y complicaciones en el paciente. Los tratamientos basados en el uso de células madre mesenquimales (CMM) autólogas han tenido éxito; sin embargo, su implementación conlleva complicaciones. La gelatina de Wharton de cordón umbilical ofrece una fuente ilimitada de CMM adultas (CMMcu) con las mismas características relevantes para la aplicabilidad clínica. El presente trabajo tiene como objetivo demostrar la seguridad, eficacia y potencial terapéutico del uso de CMMcu humanas y equinas en la cicatrización de heridas dérmicas crónicas. Para ello se realizaron una serie de ensayos in vitro e in vivo. En el co-cultivo de CMMcu y células mononucleares de sangre periférica (CMSP), se observó la inhibición de la proliferación de las CMSP, demostrando que las CMMcu tanto humanas como equinas son capaces de generar un entorno tolerogénico. Por otro lado, se llevaron a cabo trasplantes xenogénicos de las CMMcu en ratones inmunocompetentes, en los cuales se realizó una lesión dérmica y, en sus bordes, se inyectaron las CMMcu murinas, equinas y humanas. El análisis de la evolución de la lesión permitió demostrar que las CMMcu de las 3 especies mejoran la cicatrización de heridas y recuperación de la pilosidad. Además, el trasplante alogénico de las CMMcu y aún más el xenogénico, no generaron rechazo ni signos de inflamación. El HLA-G es un punto de control inmunitario (CI) que se expresa ampliamente en CMMcu humanas, tiene un ortólogo funcional Q2a en ratón y hallamos que los equinos tienen una proteína CI similar. Como es sabido, el HLAG y sus ortólogos generan una inhibición del sistema inmune local, lo cual podría explicar la aceptación al trasplante de CMMcu. De esta manera, las CMMcu podrían jugar un papel importante en medicina regenerativa, aportando una nueva y eficaz alternativa terapéutica, no solo en humanos con lesiones dérmicas crónicas, sino también en otras especies como los caballos, que presentan frecuentes lesiones cutáneas en las patas. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200377 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Introducción: El género Wolbachia, bacterias Gram-negativas intracelulares obligadas, infecta a artrópodos y nemátodos. Su amplia distribución, así como la capacidad de manipular la reproducción de sus hospedadores las convierten en una buena candidata como potencial herramienta de control biológico. Culicoides Latreille es el género más diverso de la familia Ceratopogonidae e incluye especies que actúan como vectores de protozoos, nemátodos y virus. El virus de la Lengua Azul es una enfermedad que ataca al ganado silvestre y de cría causando pérdidas económicas importantes, cuyo principal vector es Culicoides insignis Lutz. Objetivo: Detectar la presencia de Wolbachia en C. insignis mediante la técnica de PCR. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200377 2022-01-01T00:00:00Z Introducción: El género Wolbachia, bacterias Gram-negativas intracelulares obligadas, infecta a artrópodos y nemátodos. Su amplia distribución, así como la capacidad de manipular la reproducción de sus hospedadores las convierten en una buena candidata como potencial herramienta de control biológico. Culicoides Latreille es el género más diverso de la familia Ceratopogonidae e incluye especies que actúan como vectores de protozoos, nemátodos y virus. El virus de la Lengua Azul es una enfermedad que ataca al ganado silvestre y de cría causando pérdidas económicas importantes, cuyo principal vector es Culicoides insignis Lutz. Objetivo: Detectar la presencia de Wolbachia en C. insignis mediante la técnica de PCR. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200376 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 La fotofosforilación es la culminación del metabolismo productor de energía en los organismos fotosintéticos, sintetizando ATP a partir de la energía solar absorbida. Este proceso se lleva a cabo mediante una serie de complejos supramoleculares anclados en membranas, los cuales forman la cadena transportadora de electrones. Para nuestro estudio centramos el análisis en la transferencia de carga (TC) entre los complejos concatenados III y IV mediante métodos fotoacústicos (LIOAS), espectrofotométricos y computacionales. Analizamos la cinética y termodinámica de TC entre un complejo de Ru(II) y Re(I), los cuales se oxidan, y el Citocromo c, el cual se reduce ganando electrones. La transferencia es iniciada por un pulso láser que genera cambios volumétricos en la muestra de reacción: una contracción seguida de dos expansiones volumétricas para el Citocromo c y el complejo de Ru(bpy)₃⁺². Posteriormente, considerando un modelo biológico análogo, estudiamos la transferencia de carga entre el Citocromo c y el centro Cu de la Citocromo c Oxidasa (CcO), donde el Citocromo c se oxida y la CcO se reduce. Luego de la experiencia, definimos los 4 intermediarios de reacción formados: el complejo proteico excitado Citocromo c - centro Cu de la CcO; especies ferrosas del complejo proteico; especies oxiferrosas del complejo proteico; y finalmente, la transferencia electrónica de corto rango entre el oxígeno y el grupo hemo. Concluimos que las técnicas utilizadas nos permitieron obtener información de los cambios conformacionales sufridos por las proteínas durante los procesos de transferencia de carga medidos en función del cambio de presión inducido en una muestra líquida luego de la excitación con un pulso láser, directamente relacionados con un cambio de volumen estructural. Además, el análisis nos permitió obtener el tiempo de vida de las especies transientes durante la transferencia de carga, y la medida de los cambios energéticos sufridos por el sistema de estudio. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200376 2022-01-01T00:00:00Z La fotofosforilación es la culminación del metabolismo productor de energía en los organismos fotosintéticos, sintetizando ATP a partir de la energía solar absorbida. Este proceso se lleva a cabo mediante una serie de complejos supramoleculares anclados en membranas, los cuales forman la cadena transportadora de electrones. Para nuestro estudio centramos el análisis en la transferencia de carga (TC) entre los complejos concatenados III y IV mediante métodos fotoacústicos (LIOAS), espectrofotométricos y computacionales. Analizamos la cinética y termodinámica de TC entre un complejo de Ru(II) y Re(I), los cuales se oxidan, y el Citocromo c, el cual se reduce ganando electrones. La transferencia es iniciada por un pulso láser que genera cambios volumétricos en la muestra de reacción: una contracción seguida de dos expansiones volumétricas para el Citocromo c y el complejo de Ru(bpy)₃⁺². Posteriormente, considerando un modelo biológico análogo, estudiamos la transferencia de carga entre el Citocromo c y el centro Cu de la Citocromo c Oxidasa (CcO), donde el Citocromo c se oxida y la CcO se reduce. Luego de la experiencia, definimos los 4 intermediarios de reacción formados: el complejo proteico excitado Citocromo c - centro Cu de la CcO; especies ferrosas del complejo proteico; especies oxiferrosas del complejo proteico; y finalmente, la transferencia electrónica de corto rango entre el oxígeno y el grupo hemo. Concluimos que las técnicas utilizadas nos permitieron obtener información de los cambios conformacionales sufridos por las proteínas durante los procesos de transferencia de carga medidos en función del cambio de presión inducido en una muestra líquida luego de la excitación con un pulso láser, directamente relacionados con un cambio de volumen estructural. Además, el análisis nos permitió obtener el tiempo de vida de las especies transientes durante la transferencia de carga, y la medida de los cambios energéticos sufridos por el sistema de estudio. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200375 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 La estructura, estabilidad, solubilidad y función de las proteínas dependen de su carga neta, la cual está determinada por el estado de ionización de los residuos individuales. Alrededor del 25% de los residuos de las proteínas contienen cadenas laterales ionizables que son de gran importancia para el mecanismo de acción de las enzimas y para la unión de las proteínas a otras moléculas pequeñas y grandes. La carga neta de la proteína no solo depende del pH sino también de las moléculas vecinas, el potencial electrostático de una superficie cercana perturba los residuos titulables. Cuando las proteínas se acercan a superficies cargadas los protones migran hacia y desde sitios ionizables cambiando su estado de protonación de manera de disminuir la energía libre, como consecuencia, la distribución de carga cambia. Desarrollamos una teoría termodinámica molecular para estudiar la interacción de proteínas con superficies planas cargadas, modelamos una superficie de carga fija negativa y dos superficies que regulan carga con diferente densidad superficial de grupos OH. Las proteínas se describen utilizando un modelo de grano grueso basado en su estructura cristalográfica tridimensional y el pKa experimental promedio de los residuos de aminoácidos. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200375 2022-01-01T00:00:00Z La estructura, estabilidad, solubilidad y función de las proteínas dependen de su carga neta, la cual está determinada por el estado de ionización de los residuos individuales. Alrededor del 25% de los residuos de las proteínas contienen cadenas laterales ionizables que son de gran importancia para el mecanismo de acción de las enzimas y para la unión de las proteínas a otras moléculas pequeñas y grandes. La carga neta de la proteína no solo depende del pH sino también de las moléculas vecinas, el potencial electrostático de una superficie cercana perturba los residuos titulables. Cuando las proteínas se acercan a superficies cargadas los protones migran hacia y desde sitios ionizables cambiando su estado de protonación de manera de disminuir la energía libre, como consecuencia, la distribución de carga cambia. Desarrollamos una teoría termodinámica molecular para estudiar la interacción de proteínas con superficies planas cargadas, modelamos una superficie de carga fija negativa y dos superficies que regulan carga con diferente densidad superficial de grupos OH. Las proteínas se describen utilizando un modelo de grano grueso basado en su estructura cristalográfica tridimensional y el pKa experimental promedio de los residuos de aminoácidos. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200373 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 La administración de una dieta rica en fructosa (DRF) a ratas normales induce cambios endocrinometabólicos similares a los de la prediabetes (PD) humana, donde el estrés del retículo endoplasmático (RE) tendría un rol crucial. Nuestro objetivo fue estudiar el rol del estrés del RE y de la respuesta inflamatoria en la disfunción de las células β pancreáticas inducida por DRF. Para ello, ratas macho normales se alimentaron 21 días con una dieta comercial estándar y agua corriente (C), o con el mismo alimento y una solución acuosa de fructosa al 10% p/v (DRF). Al sacrificio se midieron los niveles séricos de glucosa, triglicéridos (TG), col-total, col-HDL y se calculó el índice de insulinorresistencia (IR) dado por la relación TG/col-HDL. Se extrajo el páncreas y se aislaron los islotes para medir secreción de insulina estimulada por glucosa (SIEG) y los niveles de expresión génica (qPCR) de marcadores de estrés del RE, autofagia, inflamación y apoptosis. Las ratas DRF aumentaron significativamente los niveles de TG, colnoHDL y el índice IR, y no tuvieron cambios en col-total y col-HDL. En ellas también aumentó la SIEG (con glucosa 16,7 mM) y los niveles de ARNm de los marcadores de estrés del RE (CHOP, ATF4 y XBP1s), autofagia (HSc70), apoptosis (Casp-3, Casp-12, Bcl-2 y Bad) e inflamación (TNF-α, IL-1β y PAI-1); p&lt;0,05. En conclusión, la DRF induce dislipemia, IR, sobrecarga funcional de las células β, estrés del RE, apoptosis y la respuesta inflamatoria, contribuyendo a promover la disfunción y disminución de la masa de células β. Una alternativa prometedora para desarrollar nuevas herramientas terapéuticas de prevención y tratamiento de la DT2 podría ser la atenuación del estrés del RE a través de chaperonas químicas. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200373 2022-01-01T00:00:00Z La administración de una dieta rica en fructosa (DRF) a ratas normales induce cambios endocrinometabólicos similares a los de la prediabetes (PD) humana, donde el estrés del retículo endoplasmático (RE) tendría un rol crucial. Nuestro objetivo fue estudiar el rol del estrés del RE y de la respuesta inflamatoria en la disfunción de las células β pancreáticas inducida por DRF. Para ello, ratas macho normales se alimentaron 21 días con una dieta comercial estándar y agua corriente (C), o con el mismo alimento y una solución acuosa de fructosa al 10% p/v (DRF). Al sacrificio se midieron los niveles séricos de glucosa, triglicéridos (TG), col-total, col-HDL y se calculó el índice de insulinorresistencia (IR) dado por la relación TG/col-HDL. Se extrajo el páncreas y se aislaron los islotes para medir secreción de insulina estimulada por glucosa (SIEG) y los niveles de expresión génica (qPCR) de marcadores de estrés del RE, autofagia, inflamación y apoptosis. Las ratas DRF aumentaron significativamente los niveles de TG, colnoHDL y el índice IR, y no tuvieron cambios en col-total y col-HDL. En ellas también aumentó la SIEG (con glucosa 16,7 mM) y los niveles de ARNm de los marcadores de estrés del RE (CHOP, ATF4 y XBP1s), autofagia (HSc70), apoptosis (Casp-3, Casp-12, Bcl-2 y Bad) e inflamación (TNF-α, IL-1β y PAI-1); p&lt;0,05. En conclusión, la DRF induce dislipemia, IR, sobrecarga funcional de las células β, estrés del RE, apoptosis y la respuesta inflamatoria, contribuyendo a promover la disfunción y disminución de la masa de células β. Una alternativa prometedora para desarrollar nuevas herramientas terapéuticas de prevención y tratamiento de la DT2 podría ser la atenuación del estrés del RE a través de chaperonas químicas. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200372 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Actualmente existe mucha preocupación en el sector agroalimentario por los problemas medioambientales causados por la eliminación de residuos y subproductos. Las industrias aceiteras, en particular la de chía, producen aproximadamente 650 kg de expeller de chía/tonelada. Por ello, se están desarrollando estrategias para reducir los desperdicios del sistema alimentario. Se realizó una hidrólisis enzimática secuencial con Alcalasa (A) y Flavourzima (F), se evidenciaron los resultados determinando el grado de hidrólisis (GH) y electroforesis (SDS-PAGE). Se evaluaron actividades biológicas de los péptidos presentes en H-A90F90: actividad antioxidante mediante ABTS y DPPH, actividad antihipertensiva mediante actividad inhibitoria de la enzima conversora de Angiotensina (ECA) y actividad antitrombótica mediante las vías intrínseca y extrínseca de coagulación. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200372 2022-01-01T00:00:00Z Actualmente existe mucha preocupación en el sector agroalimentario por los problemas medioambientales causados por la eliminación de residuos y subproductos. Las industrias aceiteras, en particular la de chía, producen aproximadamente 650 kg de expeller de chía/tonelada. Por ello, se están desarrollando estrategias para reducir los desperdicios del sistema alimentario. Se realizó una hidrólisis enzimática secuencial con Alcalasa (A) y Flavourzima (F), se evidenciaron los resultados determinando el grado de hidrólisis (GH) y electroforesis (SDS-PAGE). Se evaluaron actividades biológicas de los péptidos presentes en H-A90F90: actividad antioxidante mediante ABTS y DPPH, actividad antihipertensiva mediante actividad inhibitoria de la enzima conversora de Angiotensina (ECA) y actividad antitrombótica mediante las vías intrínseca y extrínseca de coagulación. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200371 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 En este proyecto de tesina, trabajaremos sobre la hipótesis del rol protectivo que ejerce apolipoproteína A-I (apoA-I), la proteína mayoritaria de las HDL, al remover lípidos celulares y posibilitar el cambio hacia un fenotipo anti-inflamatorio en macrófagos. Los desórdenes en el metabolismo de lipoproteínas constituyen una de las principales causas de enfermedad cardiovascular prematura, siendo la deficiencia de colesterol en HDL, así como los niveles elevados de colesterol en LDL, las anormalidades más frecuentes. La aterogénesis involucra la unión de lipoproteínas plasmáticas, principalmente LDLs oxidadas, en la pared arterial, lo que induce el reclutamiento de macrófagos, que fagocitan progresivamente las LDLox, adoptando el fenotipo espumoso; éstos se acumulan en el endotelio formando la placa ateromatosa inicial y promueven la respuesta inflamatoria. El fenotipo de macrófagos M1 es el tipo pro-inflamatorio; mientras que el fenotipo M2 está involucrado en la resolución de la inflamación. Sin embargo, no hay datos referentes sobre la caracterización fenotípica del estado inflamatorio (M1/M2) como consecuencia de las respuestas que podría causar una proteína típica antiaterogénica como es apoA-I. Así proponemos: Purificar apoA-I WT recombinante expresada en bacterias BL21(DE3). Obtener LDLs de plasma humano por ultracentrifugación en gradiente de densidad de NaBr y posterior cromatografía de exclusión molecular en columna de Sephacryl 300. Obtener LDL oxidadas por tratamiento con sulfato de cobre. Evaluar la polarización hacia un perfil pro/anti inflamatorio en macrófagos en presencia de LDLox y/o de apoA-I WT, mediante citometría de flujo; empleando anticuerpos anti- CD86 para M1 y anti-CD206 para M2, marcados con fluoróforos (AF488 y PE). Para lo cual, monocitos humanos de la línea THP1 serán diferenciados a macrófagos con ésteres de forbol, posteriormente transformados en células espumosas por incubación con LDLox, y finalmente tratados con apoA-I WT. Es probable que la exposición de macrófagos a LDLox determine la aparición del fenotipo M1, y en presencia de apoA-I, del fenotipo M2, lo cual aportará información para caracterizar a los distintos subtipos celulares. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200371 2022-01-01T00:00:00Z En este proyecto de tesina, trabajaremos sobre la hipótesis del rol protectivo que ejerce apolipoproteína A-I (apoA-I), la proteína mayoritaria de las HDL, al remover lípidos celulares y posibilitar el cambio hacia un fenotipo anti-inflamatorio en macrófagos. Los desórdenes en el metabolismo de lipoproteínas constituyen una de las principales causas de enfermedad cardiovascular prematura, siendo la deficiencia de colesterol en HDL, así como los niveles elevados de colesterol en LDL, las anormalidades más frecuentes. La aterogénesis involucra la unión de lipoproteínas plasmáticas, principalmente LDLs oxidadas, en la pared arterial, lo que induce el reclutamiento de macrófagos, que fagocitan progresivamente las LDLox, adoptando el fenotipo espumoso; éstos se acumulan en el endotelio formando la placa ateromatosa inicial y promueven la respuesta inflamatoria. El fenotipo de macrófagos M1 es el tipo pro-inflamatorio; mientras que el fenotipo M2 está involucrado en la resolución de la inflamación. Sin embargo, no hay datos referentes sobre la caracterización fenotípica del estado inflamatorio (M1/M2) como consecuencia de las respuestas que podría causar una proteína típica antiaterogénica como es apoA-I. Así proponemos: Purificar apoA-I WT recombinante expresada en bacterias BL21(DE3). Obtener LDLs de plasma humano por ultracentrifugación en gradiente de densidad de NaBr y posterior cromatografía de exclusión molecular en columna de Sephacryl 300. Obtener LDL oxidadas por tratamiento con sulfato de cobre. Evaluar la polarización hacia un perfil pro/anti inflamatorio en macrófagos en presencia de LDLox y/o de apoA-I WT, mediante citometría de flujo; empleando anticuerpos anti- CD86 para M1 y anti-CD206 para M2, marcados con fluoróforos (AF488 y PE). Para lo cual, monocitos humanos de la línea THP1 serán diferenciados a macrófagos con ésteres de forbol, posteriormente transformados en células espumosas por incubación con LDLox, y finalmente tratados con apoA-I WT. Es probable que la exposición de macrófagos a LDLox determine la aparición del fenotipo M1, y en presencia de apoA-I, del fenotipo M2, lo cual aportará información para caracterizar a los distintos subtipos celulares. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200368 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Los hongos entomopatógenos resultan atractivos para el control de insectos plaga en la agricultura por no dejar residuos nocivos para el hombre y el medio ambiente y no generar fenómenos de resistencia en los insectos (Lacey et al., 2015). Los microesclerocios (ME) son propágulos fúngicos tolerantes a la desecación formados por agregados de hifas melanizadas de 200-600 μm de diámetro (Jackson y Jaronski, 2012). Actualmente no se conoce la identidad ni el rol de las melaninas en ME de hongos entomopatógenos. El agregado en concentraciones subletales de inhibidores de la síntesis de melaninas en los medios de cultivo es una técnica ampliamente utilizada en la caracterización de estos pigmentos, y los resultados derivados de ese tipo de experimentos suelen ser suficientes para determinar la presencia y el tipo de melanina en las células estudiadas (Butler y Day, 1998). Se cultivó el hongo entomopatógeno Metarhizium robertsii cepa ARSEF 2575 en medios líquidos en presencia y ausencia de triciclazole (inhibidor de melaninas tipo DHN) a distintas concentraciones. Se analizaron distintos parámetros del cultivo como pH, biomasa seca, concentración y tamaño de propágulos producidos, concentración de pigmentos, tolerancia al secado y a la temperatura, de acuerdo a Saparrat et al. (2009), Huarte-Bonnet et. al (2019), Babitskaya et al. (2000), y Paixao et. al (2021). Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200368 2022-01-01T00:00:00Z Los hongos entomopatógenos resultan atractivos para el control de insectos plaga en la agricultura por no dejar residuos nocivos para el hombre y el medio ambiente y no generar fenómenos de resistencia en los insectos (Lacey et al., 2015). Los microesclerocios (ME) son propágulos fúngicos tolerantes a la desecación formados por agregados de hifas melanizadas de 200-600 μm de diámetro (Jackson y Jaronski, 2012). Actualmente no se conoce la identidad ni el rol de las melaninas en ME de hongos entomopatógenos. El agregado en concentraciones subletales de inhibidores de la síntesis de melaninas en los medios de cultivo es una técnica ampliamente utilizada en la caracterización de estos pigmentos, y los resultados derivados de ese tipo de experimentos suelen ser suficientes para determinar la presencia y el tipo de melanina en las células estudiadas (Butler y Day, 1998). Se cultivó el hongo entomopatógeno Metarhizium robertsii cepa ARSEF 2575 en medios líquidos en presencia y ausencia de triciclazole (inhibidor de melaninas tipo DHN) a distintas concentraciones. Se analizaron distintos parámetros del cultivo como pH, biomasa seca, concentración y tamaño de propágulos producidos, concentración de pigmentos, tolerancia al secado y a la temperatura, de acuerdo a Saparrat et al. (2009), Huarte-Bonnet et. al (2019), Babitskaya et al. (2000), y Paixao et. al (2021). http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200360 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 There is extensive evidence that young blood and plasma possess revitalizing properties in old animals of the same species. In parabiosis experiments, where the circulatory systems of two animals of different ages are joined, a phenotypic change from old animals to the phenotype of a young animal, and vice versa, has been observed. Later works managed to elucidate that the factors responsible for these changes were in the plasmatic fraction of the blood. In our work, inspired by parabiosis experiments, plasma extracted from the blood of young rats was injected into elderly rats, achieving appreciable phenotypic improvements compared to control animals. In this work, we report that repeated injections of young rat plasma to females, initially 25 months old, prolongs the half-life of the animals by almost 2.5 months (about 10 % of their natural lifespan). Treated rats maintained a more youthful appearance than untreated controls. Blood methylation analysis revealed that treated rats remained epigenetically younger than controls. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200360 2022-01-01T00:00:00Z There is extensive evidence that young blood and plasma possess revitalizing properties in old animals of the same species. In parabiosis experiments, where the circulatory systems of two animals of different ages are joined, a phenotypic change from old animals to the phenotype of a young animal, and vice versa, has been observed. Later works managed to elucidate that the factors responsible for these changes were in the plasmatic fraction of the blood. In our work, inspired by parabiosis experiments, plasma extracted from the blood of young rats was injected into elderly rats, achieving appreciable phenotypic improvements compared to control animals. In this work, we report that repeated injections of young rat plasma to females, initially 25 months old, prolongs the half-life of the animals by almost 2.5 months (about 10 % of their natural lifespan). Treated rats maintained a more youthful appearance than untreated controls. Blood methylation analysis revealed that treated rats remained epigenetically younger than controls. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200359 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 El consumo de alimentos basados en insectos (entomofagia) se encuentra en alza a nivel global. Entre los beneficios de esta práctica se destacan la economía, la sustentabilidad y la nutrición. Si bien en Argentina esta actividad aún no ha sido suficientemente explorada y explotada, muchos países presentan ya una larga tradición de consumo de insectos como parte de su dieta ancestral, o la han adoptado como una nueva oportunidad de desarrollo económico dadas las perspectivas mundiales. Actualmente, se encuentran catalogadas miles de especies de insectos aptas para el consumo humano, entre las que resaltan los ortópteros (como los grillos y langostas) por su facilidad de cultivo en cautiverio. Este trabajo aborda la obtención de un ingrediente en polvo a base de grillos de la especie Gryllus assimilis, así como su caracterización nutricional. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200359 2022-01-01T00:00:00Z El consumo de alimentos basados en insectos (entomofagia) se encuentra en alza a nivel global. Entre los beneficios de esta práctica se destacan la economía, la sustentabilidad y la nutrición. Si bien en Argentina esta actividad aún no ha sido suficientemente explorada y explotada, muchos países presentan ya una larga tradición de consumo de insectos como parte de su dieta ancestral, o la han adoptado como una nueva oportunidad de desarrollo económico dadas las perspectivas mundiales. Actualmente, se encuentran catalogadas miles de especies de insectos aptas para el consumo humano, entre las que resaltan los ortópteros (como los grillos y langostas) por su facilidad de cultivo en cautiverio. Este trabajo aborda la obtención de un ingrediente en polvo a base de grillos de la especie Gryllus assimilis, así como su caracterización nutricional. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200358 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Los cambios en la [glucosa]ₑ (∆GE) alteran el manejo del Ca²⁺ᵢ, induciendo eventos arritmogénicos (EA) dependientes de Ca²⁺-Calmodulina quinasa II (CaMKII), que activa el intercambiador Na⁺-Ca²⁺ (NCX) en modo directo. La entrada de Na⁺, generaría latidos ectópicos y este fenómeno estaría favorecido por la participación del cotransportador Na⁺/glucosa 1 (SGLT1), que es la única isoforma en el corazón. En este contexto, los EA inducidos por ∆GE no ha sido estudiada, y este es nuestro objetivo del siguiente proyecto. Utilizamos miocitos aislados cargados con Fura-2-AM, a los que medimos Ca²⁺ᵢ por epifluorescencia (transitorio de Ca²⁺ intracelular, CaᵢT), y utilizamos corazón perfundido con la técnica de langendorff donde medimos presión desarrollada. Usamos un inhibidor de SGLT, phlorozin 10 μM. El ∆GE de 5,5 mM (glucosa baja, BG) a 11 mM (Glucosa normal, GN) y de GN a 25 mM (glucosa alta, AG), indujo mayormente alteraciones en el manejo del Ca²⁺ᵢ, como un aumento o una disminución del CaᵢT. Independientemente de los efectos sobre CaᵢT tras el ∆GE, observamos EA en un 100% de LG-GN y un 78% de GN-AG. En corazones enteros aislados, observamos el mismo patrón de EA que observamos en miocitos aislados con el ∆GE. Cuando usamos phlorozin, la aparición de EA se prolongó significativamente en ambas preparaciones. En conclusión, el ∆GE agudo induciría EA dependiente de la actividad de SGLT1. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200358 2022-01-01T00:00:00Z Los cambios en la [glucosa]ₑ (∆GE) alteran el manejo del Ca²⁺ᵢ, induciendo eventos arritmogénicos (EA) dependientes de Ca²⁺-Calmodulina quinasa II (CaMKII), que activa el intercambiador Na⁺-Ca²⁺ (NCX) en modo directo. La entrada de Na⁺, generaría latidos ectópicos y este fenómeno estaría favorecido por la participación del cotransportador Na⁺/glucosa 1 (SGLT1), que es la única isoforma en el corazón. En este contexto, los EA inducidos por ∆GE no ha sido estudiada, y este es nuestro objetivo del siguiente proyecto. Utilizamos miocitos aislados cargados con Fura-2-AM, a los que medimos Ca²⁺ᵢ por epifluorescencia (transitorio de Ca²⁺ intracelular, CaᵢT), y utilizamos corazón perfundido con la técnica de langendorff donde medimos presión desarrollada. Usamos un inhibidor de SGLT, phlorozin 10 μM. El ∆GE de 5,5 mM (glucosa baja, BG) a 11 mM (Glucosa normal, GN) y de GN a 25 mM (glucosa alta, AG), indujo mayormente alteraciones en el manejo del Ca²⁺ᵢ, como un aumento o una disminución del CaᵢT. Independientemente de los efectos sobre CaᵢT tras el ∆GE, observamos EA en un 100% de LG-GN y un 78% de GN-AG. En corazones enteros aislados, observamos el mismo patrón de EA que observamos en miocitos aislados con el ∆GE. Cuando usamos phlorozin, la aparición de EA se prolongó significativamente en ambas preparaciones. En conclusión, el ∆GE agudo induciría EA dependiente de la actividad de SGLT1. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200306 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 INTRODUCCIÓN: Los compuestos fenólicos presentes en diversos efluentes poseen alta toxicidad¹. Una alternativa para su eliminación es el uso de biogránulos, los cuales pueden formarse a partir de lodos activados en reactores discontinuos secuenciales (SBR). En los últimos años ha crecido el interés en revalorizar efluentes para generar productos con valor agregado como polihidroxialcanoatos (PHAs), polímeros con propiedades similares a plásticos petroquímicos². En el presente trabajo se estudió la eficiencia de un SBR granular aeróbico para remover fenol y la factibilidad de acumular PHAs. MATERIALES Y MÉTODOS: El SBR consistió en una columna aireada alimentada con un efluente sintético: acetato de sodio y fenol como fuente de carbono y energía (FCE), DQO:N:P=100:5:2. Se operó en 4 condiciones: Aclimatación, carga baja de fenol (BF), media (MF) y alta (AF). Ciclos operativos=24 hs. Se determinó demanda química de oxígeno, concentración de fenol y biomasa (ST), microscopía y detección de PHA (tinción Sudan Black), índice de sedimentabilidad volumétrico (ISV) y velocidades volumétricas y específicas de remoción de fenol (rfenol, mg/(L.h; qfenol, mg/(gST.h)). RESULTADOS: Se logró remoción completa de fenol. La reducción del tiempo de sedimentación y el aumento de la carga de fenol permitieron la selección de gránulos de sedimentación rápida y mayor velocidad de remoción. Se detectó la presencia de gránulos intracelulares de PHA. CONCLUSIONES: Utilizando fenol como única FCE se logró un sistema estable con alta capacidad de degradación. La detección intracelular de PHA es prometedora para continuar en futuros estudios de revalorización de efluentes fenólicos. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200306 2022-01-01T00:00:00Z INTRODUCCIÓN: Los compuestos fenólicos presentes en diversos efluentes poseen alta toxicidad¹. Una alternativa para su eliminación es el uso de biogránulos, los cuales pueden formarse a partir de lodos activados en reactores discontinuos secuenciales (SBR). En los últimos años ha crecido el interés en revalorizar efluentes para generar productos con valor agregado como polihidroxialcanoatos (PHAs), polímeros con propiedades similares a plásticos petroquímicos². En el presente trabajo se estudió la eficiencia de un SBR granular aeróbico para remover fenol y la factibilidad de acumular PHAs. MATERIALES Y MÉTODOS: El SBR consistió en una columna aireada alimentada con un efluente sintético: acetato de sodio y fenol como fuente de carbono y energía (FCE), DQO:N:P=100:5:2. Se operó en 4 condiciones: Aclimatación, carga baja de fenol (BF), media (MF) y alta (AF). Ciclos operativos=24 hs. Se determinó demanda química de oxígeno, concentración de fenol y biomasa (ST), microscopía y detección de PHA (tinción Sudan Black), índice de sedimentabilidad volumétrico (ISV) y velocidades volumétricas y específicas de remoción de fenol (rfenol, mg/(L.h; qfenol, mg/(gST.h)). RESULTADOS: Se logró remoción completa de fenol. La reducción del tiempo de sedimentación y el aumento de la carga de fenol permitieron la selección de gránulos de sedimentación rápida y mayor velocidad de remoción. Se detectó la presencia de gránulos intracelulares de PHA. CONCLUSIONES: Utilizando fenol como única FCE se logró un sistema estable con alta capacidad de degradación. La detección intracelular de PHA es prometedora para continuar en futuros estudios de revalorización de efluentes fenólicos. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200305 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 La maduración in vitro (MIV) de ovocitos bovinos es un proceso complejo que incluye procesos nucleares y citoplasmáticos que capacitan al ovocito para ser fertilizado. Una maduración exitosa se ve reflejada en la progresión de la meiosis hasta la metafase II con extrusión del primer corpúsculo polar (MII + CP) y una distribución periférica de los gránulos corticales (GC). Se ha estudiado que muchas drogas de uso veterinario afectan los gametos y procesos reproductivos, ocasionando daño genotóxico y citotóxico, sin embargo, son escasas las investigaciones en el área. El fluazurón (FLZ) es uno de los antiparasitarios más usados para controlar la garrapata que afecta el ganado. Se aplica sobre los animales por pulverización, inyección o vertido sobre la espalda; parte es absorbido por el metabolismo del animal, y sólo una pequeña fracción llega a la garrapata. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto toxicológico del FLZ durante la MIV de ovocitos bovinos. Para tal fin, se utilizaron ovocitos bovinos provenientes de ovarios de frigorífico. El medio de MIV fue TCM 199 con 10% de suero fetal bovino, hormonas y antibióticos, el cual fue tratado con 1% DMSO (control) y (50, 75 y 100) μg FLZ/ml. Además, se trabajó con un control positivo (0,10 μg cicloheximida/ml) para verificar la eficacia de las técnicas empleadas. Se maduraron 20 ovocitos por tratamiento durante 24 h a 39 °C con 5% de CO₂ y se realizaron 5 réplicas por punto experimental. Se estudió la maduración nuclear con tinción de Hoechst 33342 analizando la presencia de vesícula germinal (VG), metafase I (MI), MII + CP y ovocitos degenerados (D); y la maduración citoplasmática mediante la evaluación de los GC con tinción de FITC-PNA analizando su distribución como homogénea (H), transición (T), periférica (P) y degenerada (D). Luego del tratamiento, los ovocitos fueron fijados con formaldehído al 4% y analizados con un microscopio de fluorescencia a 20X. Los datos fueron analizados mediante una regresión logística utilizando el software GLIMIX (SAS Institute), registrándose diferencias significativas cuando P<0,05. Los resultados demostraron que: 1) FLZ disminuyó la tasa de ovocitos MII+CP (P<0,002) e incrementó los ovocitos D respecto al control (P<0,05) con todas las concentraciones ensayadas; 2) Los ovocitos P disminuyen con 100 μg FLZ/ml respecto al control (P<0,05). Estos primeros ensayos refuerzan la necesidad de seguir evaluando al FLZ como tóxico reproductivo. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200305 2022-01-01T00:00:00Z La maduración in vitro (MIV) de ovocitos bovinos es un proceso complejo que incluye procesos nucleares y citoplasmáticos que capacitan al ovocito para ser fertilizado. Una maduración exitosa se ve reflejada en la progresión de la meiosis hasta la metafase II con extrusión del primer corpúsculo polar (MII + CP) y una distribución periférica de los gránulos corticales (GC). Se ha estudiado que muchas drogas de uso veterinario afectan los gametos y procesos reproductivos, ocasionando daño genotóxico y citotóxico, sin embargo, son escasas las investigaciones en el área. El fluazurón (FLZ) es uno de los antiparasitarios más usados para controlar la garrapata que afecta el ganado. Se aplica sobre los animales por pulverización, inyección o vertido sobre la espalda; parte es absorbido por el metabolismo del animal, y sólo una pequeña fracción llega a la garrapata. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto toxicológico del FLZ durante la MIV de ovocitos bovinos. Para tal fin, se utilizaron ovocitos bovinos provenientes de ovarios de frigorífico. El medio de MIV fue TCM 199 con 10% de suero fetal bovino, hormonas y antibióticos, el cual fue tratado con 1% DMSO (control) y (50, 75 y 100) μg FLZ/ml. Además, se trabajó con un control positivo (0,10 μg cicloheximida/ml) para verificar la eficacia de las técnicas empleadas. Se maduraron 20 ovocitos por tratamiento durante 24 h a 39 °C con 5% de CO₂ y se realizaron 5 réplicas por punto experimental. Se estudió la maduración nuclear con tinción de Hoechst 33342 analizando la presencia de vesícula germinal (VG), metafase I (MI), MII + CP y ovocitos degenerados (D); y la maduración citoplasmática mediante la evaluación de los GC con tinción de FITC-PNA analizando su distribución como homogénea (H), transición (T), periférica (P) y degenerada (D). Luego del tratamiento, los ovocitos fueron fijados con formaldehído al 4% y analizados con un microscopio de fluorescencia a 20X. Los datos fueron analizados mediante una regresión logística utilizando el software GLIMIX (SAS Institute), registrándose diferencias significativas cuando P<0,05. Los resultados demostraron que: 1) FLZ disminuyó la tasa de ovocitos MII+CP (P<0,002) e incrementó los ovocitos D respecto al control (P<0,05) con todas las concentraciones ensayadas; 2) Los ovocitos P disminuyen con 100 μg FLZ/ml respecto al control (P<0,05). Estos primeros ensayos refuerzan la necesidad de seguir evaluando al FLZ como tóxico reproductivo. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200304 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 During aging, the central nervous system (CNS) undergoes a variety of morphological and functional changes. We are interested in studying glia in their natural environment and how aging affects their numbers and functions. Although glial cells are critical for CNS development and maintenance, there is little published research addressing their distribution in different brain regions across the lifespan. Most studies involve mice, which limits the extrapolation of data to the rat. Our aim was to investigate how the number and morphology of microglial cells changes in naïve rats at different ages and whether there is a relationship with behavior. Behavioral tests were performed with female Sprague-Dawley rats at 2, 6, 12, and 24 months of age to examine depression-like behavior, shortand long-term memory, exploratory and anxiety-like behavior. We also analyzed immunoreactive Iba1 cells. We observed impaired spatial memory and anxiety- and depression-like behavior in 24-month-old rats compared with 6- and 12-month-old rats. As for microglia, there was a significant increase in the number of Iba1+ in the hippocampus and stratum radiatum in 24-month-old rats compared with 6-month-old rats. Morphology data showed a difference between young and old rats. Our results suggest that the behavior of female rats is age-dependent, as is the distribution and morphology of microglia. Further studies are needed to explore the phenotype and functions of microglial cells. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200304 2022-01-01T00:00:00Z During aging, the central nervous system (CNS) undergoes a variety of morphological and functional changes. We are interested in studying glia in their natural environment and how aging affects their numbers and functions. Although glial cells are critical for CNS development and maintenance, there is little published research addressing their distribution in different brain regions across the lifespan. Most studies involve mice, which limits the extrapolation of data to the rat. Our aim was to investigate how the number and morphology of microglial cells changes in naïve rats at different ages and whether there is a relationship with behavior. Behavioral tests were performed with female Sprague-Dawley rats at 2, 6, 12, and 24 months of age to examine depression-like behavior, shortand long-term memory, exploratory and anxiety-like behavior. We also analyzed immunoreactive Iba1 cells. We observed impaired spatial memory and anxiety- and depression-like behavior in 24-month-old rats compared with 6- and 12-month-old rats. As for microglia, there was a significant increase in the number of Iba1+ in the hippocampus and stratum radiatum in 24-month-old rats compared with 6-month-old rats. Morphology data showed a difference between young and old rats. Our results suggest that the behavior of female rats is age-dependent, as is the distribution and morphology of microglia. Further studies are needed to explore the phenotype and functions of microglial cells. http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200303 Objeto de conferencia I Jornada de Divulgación en Biotecnología (La Plata, 20 y 21 de octubre de 2022); Revista digital de la 1ra Jornada de Divulgación en Biotecnología; 2022; https://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/155920; Libro de resúmenes del Congreso de Investigaciones Formativas IFLP – 2026 Estudios realizados en animales y en humanos, han demostrado que la exposición acontaminantes ambientales puede causar cambios patológicos en el aparato reproductor masculino a nivel testicular y en la calidad seminal. El AMZ es una droga insecticida y acaricida de uso veterinario que se emplea para el control de ectoparásitos en abejas, animales de granja y domésticos. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de AMZ en el espermatozoide evaluando su impacto en la capacidad de desarrollo posterior y calidad de embriones bovinos producidos in vitro. Para ello, se utilizó un pool de semen de 3 toros de probada fertilidad in vitro y se dividió en grupo Control y grupo AMZ (25 μg/ml, 2 h de exposición). Los ovocitos fueron obtenidos a partir de ovarios de frigorífico, y se sometieron a las etapas consecutivas de maduración, fertilización (FIV) y cultivo (CIV) in vitro en condiciones controladas de laboratorio. Se analizaron tasas de: clivaje de 2 a 4 células (2-4c), de más de 4 células (>4c), de blastocistos de días 7 (B7) y 8 (B8) y blastocistos totales (BT). Luego, se evaluó la tasa de apoptosis de los embriones obtenidos al día 8 de CIV mediante la técnica de TUNEL. Se maduraron un total de 226 ovocitos y se realizaron tres replicas. El modelo estadístico incluyó un enfoque bayesiano, utilizando una distribución previa normal y no informativa, para calcular los ICB del 95%. Los datos fueron analizados mediante Software RStudio. Se identificaron diferencias cuando P ≤ 0.05 y tendencias cuando P<0.1. Los resultados indicaron: una tendencia a la disminución del clivaje de 2-4 c (P=0,07) y diferencia de >4 c (P=0,0009) en el grupo AMZ respecto al Control. Además, se observó una disminución en la tasa de BT (P=0,03), dada por una menor tasa de B7 (P=0.05) del grupo AMZ respecto al Control. Se evidenció una tasa de apoptosis mayor con AMZ respecto a Control (P=0.05). Por lo expuesto, los medicamentos veterinarios requieren técnicas predictivas para la evaluación de su toxicidad en la reproducción. Nuestros estudios podrían ser indicadores de riesgo para especies no blanco y trabajadores expuestos si la aplicación del producto se realiza inadecuadamente. AMZ es liposoluble y aplicado como baño externo, por lo tanto, gran parte se dispersa en el ambiente y puede atravesar fácilmente piel y mucosas. Sat, 01 Jan 2022 00:00:00 GMT http://sedici.unlp.edu.ar:80/handle/10915/200303 2022-01-01T00:00:00Z Estudios realizados en animales y en humanos, han demostrado que la exposición acontaminantes ambientales puede causar cambios patológicos en el aparato reproductor masculino a nivel testicular y en la calidad seminal. El AMZ es una droga insecticida y acaricida de uso veterinario que se emplea para el control de ectoparásitos en abejas, animales de granja y domésticos. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de AMZ en el espermatozoide evaluando su impacto en la capacidad de desarrollo posterior y calidad de embriones bovinos producidos in vitro. Para ello, se utilizó un pool de semen de 3 toros de probada fertilidad in vitro y se dividió en grupo Control y grupo AMZ (25 μg/ml, 2 h de exposición). Los ovocitos fueron obtenidos a partir de ovarios de frigorífico, y se sometieron a las etapas consecutivas de maduración, fertilización (FIV) y cultivo (CIV) in vitro en condiciones controladas de laboratorio. Se analizaron tasas de: clivaje de 2 a 4 células (2-4c), de más de 4 células (>4c), de blastocistos de días 7 (B7) y 8 (B8) y blastocistos totales (BT). Luego, se evaluó la tasa de apoptosis de los embriones obtenidos al día 8 de CIV mediante la técnica de TUNEL. Se maduraron un total de 226 ovocitos y se realizaron tres replicas. El modelo estadístico incluyó un enfoque bayesiano, utilizando una distribución previa normal y no informativa, para calcular los ICB del 95%. Los datos fueron analizados mediante Software RStudio. Se identificaron diferencias cuando P ≤ 0.05 y tendencias cuando P<0.1. Los resultados indicaron: una tendencia a la disminución del clivaje de 2-4 c (P=0,07) y diferencia de >4 c (P=0,0009) en el grupo AMZ respecto al Control. Además, se observó una disminución en la tasa de BT (P=0,03), dada por una menor tasa de B7 (P=0.05) del grupo AMZ respecto al Control. Se evidenció una tasa de apoptosis mayor con AMZ respecto a Control (P=0.05). Por lo expuesto, los medicamentos veterinarios requieren técnicas predictivas para la evaluación de su toxicidad en la reproducción. Nuestros estudios podrían ser indicadores de riesgo para especies no blanco y trabajadores expuestos si la aplicación del producto se realiza inadecuadamente. AMZ es liposoluble y aplicado como baño externo, por lo tanto, gran parte se dispersa en el ambiente y puede atravesar fácilmente piel y mucosas.