Perfil metabólico del fluido intracanalar en pacientes viviendo con HIV/SIDA sujetos a terapia fotodinámica con azul de metileno

Abstract

Resumen: La terapia fotodinámica es una estrategia antimicrobiana que tiene como objetivo la reducción de microorganismos dentro del conducto, mejorando la respuesta inflamatoria y disminuyendo el tiempo de reparación tisular. A partir de la herramienta diagnóstica de análisis metabólico de biofluidos, se plantea la hipótesis de que la PDT proporcionará una disminución en la cantidad de metabolitos relacionados con la inflamación presentes dentro del canal radicular después de la desinfección. Por lo tanto, el objetivo del presente estudio fue identificar el perfil metabolómico del fluidos intracanal de dientes con lesión periapical en pacientes que viven con VIH/SIDA (PHIV/SIDA) cuando se utiliza la terapia fotodinámica (PDT) asociada al tratamiento endodóntico. Se seleccionaron aleatoriamente 32 pacientes de diagnóstico de lesión periapical para participar en el estudio. Éstos fueron divididos en 4 grupos, siendo los grupos G1 y G2 compuestos por pacientes que viven con HIV/SIDA con y sin el uso de terapia fotodinámica (PDT), respectivamente, y los grupos G3 y G4, separados de la misma forma, pero con pacientes seronegativos. Se realizó el tratamiento endodóntico - previo a la obturación final - con el fin de comparar los metabolitos encontrados en ambos momentos. La recolección se realizó con conos de papel, que fueron almacenados en Eppendorf* a -80°C hasta el momento del análisis metabolómico. Se procedió a la preparación de las muestras biológicas mediante derivatización y, posteriormente, a la extracción de compuestos para ser analizados en un cromatógrafo de gases acoplados ea un espectrómetro de masas en el laboratorio Dempster Mass Lab - Escuela Politécnica de Química de la Universidad de Sao Paulo (USP). Los resultados mostraron una considerable disminución de las concentraciones de metabolitos en todos los grupos; sin embargo, los grupos G2 y G4, sometidos a PDT asociada al tratamiento endodóntico, presentaron una reducción del 99.9% de los metabolitos en comparación con los grupos G1 y G3, que mostraron reducciones del 81.1% y 98.3% respectivamente. Por lo tanto, varios metabolitos pueden estar subexpresados frente al mecanismo de acción de la PDT como coadyuvante en el proceso de desinfección de los tratamientos endodónticos. Palabras claves: Endodoncia, HIV, Inmunodeprimidos, Terapia fotodinámica, metaboloma, Lesión periapical.

Photodynamic therapy is an antimicrobial strategy that aims at reducing microorganisms within the canal, improving the inflammatory response and decreasing tissue repair time. Based on the diagnostic tool of metabolomic analysis of biofluids, it is hypothesized that PDT will provide a decrease in the amount of inflammation-related metabolites present within the root canal after disinfection. Therefore, the aim of the present study was to identify the metabolomic profile of intracanal fluid of teethwith periapical lesion in patients living with HIV/AIDS (PHIV/AIDS) when photodynamic therapy (PDT) is used in association with endodontic treatment. 32 patients diagnosed with periapical lesion were randomly selected to participate in the study. These were divided into 4 groups, with groups G1 and G2 consisting of patients living with HIV/AIDS with and without the use of photodynamic therapy (PDT), respectively, and groups G3 and G4, separated in the same way, but with seronegative patients. Endodontic treatment was performed and intracanal fluid was collected before and at the end of endodontic treatment - prior to final filling - in order to compare the metabolites found at both times. Collection was performed with paper cones, which were stored in Eppendorf® at -80°C until metabolomic analysis. Biological samples were prepared by derivatization and, subsequently, compounds were extracted to be analyzed in a gas chromatograph coupled to a mass spectrometer at the Dempster Mass Lab - Polytechnic School of Chemistry of the University of São Paulo (USP). The results showed a considerable decrease in metabolite concentrations in all groups; However, groups G2 and G4, which underwent PDT associated with endodontic treatment, showed a 99.9% reduction in metabolites compared to groups G1 and G3, which showed reductions of 81.1% and 98.3%, respectively. Therefore, several metabolites may be underexpressed compared to the PDT action mechanism as an adjuvant in the disinfection process in endodontic treatments.