Purificación de proteínas recombinantes con NPM

Abstract

En este trabajo se evaluó la capacidad de nanopartículas magnéticas (NPM) recubiertas con Ni²⁺ para purificar proteínas recombinantes con etiquetas His 6, proponiéndolas como una alternativa simple y económica frente a los métodos cromatográficos tradicionales. Se logró sintetizar y caracterizar NPM funcionales con propiedades magnéticas adecuadas, capaces de unirse específicamente a proteínas con His 6 y mostrando baja afinidad por proteínas sin etiquetas. Mediante experimentos de purificación, se optimizaron protocolos considerando factores clave como la proporción proteína/NPM, la concentración de imidazol y el método de dispersión, siendo el ultrasonido más eficiente que el vórtex. Los mejores resultados de elución se obtuvieron con buffers de imidazol a 0,375 M, mientras que concentraciones más bajas o altas redujeron la eficiencia. Estos resultados respaldan el potencial de las NPM@Ni²⁺ como una herramienta práctica y versátil para la purificación de proteínas recombinantes, con aplicaciones tanto en investigación como en procesos industriales, contribuyendo además al desarrollo de estrategias más accesibles en biotecnología.