Resistencia de quistes de Acanthamoeba spp. a la exposición prolongada a bajas temperaturas

Abstract

Las amebas de vida libre del género Acanthamoeba son protozoos ubicuos y anfizoicos de amplia distribución en la naturaleza. Han sido aislados tanto en ambientes naturales acuáticos y terrestres como en hábitats humanos. Presentan dos biotipos: trofozoítos, formas tróficas y reproductivas; y quistes o estadios de resistencia. Son patógenos oportunistas para el ser humano pudiendo ocasionar cuadros graves de elevada morbimortalidad. Asimismo, pueden actuar de reservorio de microorganismos de importancia en salud pública. Acanthamoeba spp. permanece viable a temperaturas comprendidas entre 25°C y 35°C, pero existe escasa información respecto de lo que ocurre a bajas temperaturas. El objetivo del presente trabajo fue determinar la supervivencia de diferentes cepas de Acanthamoeba spp. frente a incubaciones continuas a temperaturas de congelación a -5°C y de freezer a -20°C. Se utilizaron 3 cepas de Acanthamoeba spp: Acanthamoeba polyphaga ATCC 30461, Acanthamoeba spp. aislada en una sala cerrada de un hospital pediátrico, y Acanthamoeba spp. recuperada de un humedal costero del sudeste bonaerense. Las cepas fueron sometidas a tratamientos de congelación a -5°C y -20°C por 30, 120 y 270 días. Se realizaron controles de crecimiento y viabilidad de quistes post exposición e identificaciones morfológicas en fresco, subcultivos y coloraciones especiales. Los resultados revelaron que el 100% de las cepas de Acanthamoeba spp. utilizadas en este estudio se mantuvieron viables por 30, 120 y 270 días tanto a -5°C como a -20°C, evidenciando la resistencia de los quistes del protozoario a la congelación. Dado que Acanthamoeba spp. no solo pueden actuar como reservorios de microorganismos de importancia sanitaria, sino que además pueden actuar como patógenos oportunistas, los resultados obtenidos poseen implicancias relevantes en el ámbito de la microbiología ambiental, la salud pública y la vigilancia epidemiológica de enfermedades infecciosas.

Free-living amoebas of the genus Acanthamoeba are ubiquitous, amphizoic protozoans widely distributed in nature. They have been isolated from both aquatic and terrestrial natural environments and from human habitats. They present two biotypes: trophozoites, trophic and reproductive forms; and cysts, or resistant stages. They are opportunistic pathogens in humans, being able to cause severe conditions with high morbidity and mortality. They can also act as reservoirs for microorganisms of public health importance. Acanthamoeba spp. remains viable at temperatures between 25°C and 35°C, but little information exists regarding their viability at low temperatures. The objective of this study was to determine the survival rate of different strains of Acanthamoeba spp. under continuous incubation at freezing temperatures of -5°C and freezer temperatures of -20°C. Three strains of Acanthamoeba spp were used: Acanthamoeba polyphaga ATCC 30461, Acanthamoeba spp. isolated in a closed ward of a pediatric hospital, and Acanthamoeba spp. recovered from a coastal wetland in southeastern Buenos Aires. The strains were subjected to congelation (-5°C) and freezing (-20°C) for 30, 120 and 270 days. Growth and viability controls of cysts post exposure were performed, as well as morphological identifications in fresh, subcultures and special stainings. The results revealed that 100% of the Acanthamoeba spp. strains used in this study remained viable for 30, 120 and 270 days at both -5°C and -20°C, evidencing the resistance of the protozoan cysts to freezing. Since Acanthamoeba spp. can not only act as reservoirs for microorganisms of health importance but can also act as opportunistic pathogens, the results obtained have significant implications for environmental microbiology, public health, and epidemiological surveillance of infectious diseases.