Estandarización de un método de replicación in vivo en Apis melifera para el virus de las alas deformadas

Abstract

El virus de las alas deformes (DWV) es el agente viral más prevalente en el país y el más dañino para las colonias de Apis mellifera, provoca alas en muñon, arrugadas o deformes, abdómenes hinchados, vida media reducida e incluso muerte y colapso de colonias. Por estas características actualmente es el virus de abejas más estudiado a nivel mundial, a pesar de esto no se disponen de líneas celulares comerciales a partir de tejidos de Apis melífera, por lo que la replicación viral en sustrato vivo es fundamental para estudiar este agente. El objetivo del presente trabajo fue estandarizar un método de replicación a partir de pupas de Apis melífera para obtención de carga viral para futuros ensayos. A partir de muestras de abejas adultas provenientes de la provincia de Córdoba se realizó un macerado en mortero con PBS estéril, extracción de ARN total y RT-PCR múltiple para la detección de DWV y ausencia de otros virus presentes en el país. Confirmada la presencia de DWV a partir del macerado se realizó una centrifugación diferencial en 2 etapas y el sobrenadante obtenido se esterilizó por filtración (0,22µm).