Estudio de la regulación de mecanismos patogénicos como estrategia antiviral frente a virus ARN de importancia en medicina veterinaria

Abstract

Los virus, y en especial los virus con genoma ARN, son capaces de inducir estrés de retículo endoplásmico en su proceso de infección, el cual es sensado por tres proteínas reticulares denominadas PERK, IRE1α y ATF6 que activan diferentes vías de señales conocidas como UPR para atenuarlo primariamente, o activar mediadores específicos que conducen a la apoptosis celular. En este trabajo de tesis se estudió la modulación in vitro del estrés reticular empleando tres virus ARN de interés veterinario como el CDV, el BVDV y el EAV. El análisis de las diferentes vías asociadas al estrés se analizó a través del empleo de técnicas de cultivos celulares para los ensayos de infección, y técnicas moleculares e inmunológicas para la detección de genes y proteínas claves activadas por los diferentes virus en su ciclo replicativo. Del mismo, se estudió la participación de proteínas virales individuales en el proceso de estrés empleando técnicas de clonado molecular y transfección de los vectores recombinantes en células eucariotas. En este estudio, se pudieron contrastar las diferencias entre vías activadas por cada modelo viral: mientras el CDV y el BVDV indujeron la activación de las tres vías, el EAV evidenció una supresión de la vía ATF6. Si bien el estudio de la expresión de las proteínas virales no se completó por dificultades con el clonado y transfección de células, los dos resultados más relevantes fueron que la inhibición de la vía PERK suprime la formación de viriones del CDV mientras resultados similares ocurren al inhibir la vía IRE1 con el EAV. Debido a la importancia de estas virosis, esclarecer los mecanismos patogénicos involucrados en sus procesos de infección resulta de gran interés para la búsqueda de futuros antivirales efectivos.