Rol de la síntesis de serina en la defensa al estrés ácido de Sinorhizobium meliloti

Abstract

El objetivo general de este trabajo fue dilucidar el rol de la biosíntesis de serina en la respuesta adaptativa de tolerancia al estrés ácido (ATR) en Sinorhizobium meliloti 2011, rizobio fijador de nitrógeno de gran interés agronómico por su simbiosis con la alfalfa (Medicago sativa L.). Para caracterizar esta vía, se analizó una cepa mutante con inserción de transposón en el gen serA (Sme 2011 ΔserA), el cual codifica para la enzima D-3-fosfoglicerato deshidrogenasa (EC 1.1.1.95), responsable del primer paso de síntesis de serina desde 3-fosfoglicerato. Se amplificó y clonó el operón serC-serA en el vector pBBR1-MCS5 y se obtuvo la construcción de complementación pALU8D2. Tras transformar la cepa mutante mediante electroporación, se realizaron ensayos fenotípicos de crecimiento en medios mínimos definidos (Evans y Sacarosa-Glutamato) a pH neutro (7.0) y ácido (6.1 y 5.6). Los resultados mostraron que la inactivación del gen serA genera una auxotrofia severa para serina, impidiendo el crecimiento bacteriano tanto en medio neutro como ácido. La adición exógena de L-serina (20 mM) restauró por completo el crecimiento del mutante a niveles comparables con la cepa salvaje. Por su parte, la complementación con pALU8D2 revirtió parcialmente el fenotipo mutante bajo condiciones de acidez. Se concluye que la vía mediada por la D-3-fosfoglicerato deshidrogenasa es clave para suplir el requerimiento básico de serina en S. meliloti, resultando indispensable para la viabilidad y el crecimiento normal de la bacteria independientemente de la condición de estrés ácido.