Caracterización de bacterias lácticas probióticas obtenidas de guano de gallinas orgánicas con capacidad de inhibición sobre Salmonella

Abstract

Los probióticos son microorganismos vivos que benefician la salud intestinal de las aves. El objetivo fue aislar y seleccionar bacterias lácticas (BAL) con características probióticas y evaluar su capacidad de inhibir Salmonella. Se tomaron muestras de heces de ponedoras Lohmann orgánicas certificadas, se inocularon en placas con agar MRS por agotamiento en superficie y se incubaron a 37°C, 48 horas (h), en anaerobiosis. Las colonias con características de BAL, confirmadas por Gram y catalasa, se repicaron en caldo MRS y se conservaron a -20°C con 20% v/v glicerol (stock). Para caracterizar las cepas, los aislados se reactivaron por dos repiques sucesivos incubados 18-24 h a 37°C. Se efectuaron pruebas de: tinción Gram, catalasa, movilidad, fermentación de glucosa, producción de CO2 a partir de glucosa, tolerancia a NaCl, susceptibilidad a vancomicina, hemolisis e hidrólisis de esculina. Para evaluar la capacidad de inhibición se empleó el método de gotas (spot agar) modificado, tomando como indicadoras distintas cepas de Salmonella pertenecientes al cepario del Bioterio Avícola y Microbiología, UNLu. Una gota de 10 mL de cada cepa BAL se depositó en placas con 15 mL de agar para recuento en placa (PCA) solidificado, se incubaron 24 h a 37°C. Sobre este desarrollo se vertieron 10 mL de agar semisólido (caldo nutritivo con 0,7% de agar), inoculado con 100 mL de cepa indicadora. Se incubó nuevamente por 24 h y se determinó la presencia y diámetro de los halos de inhibición de cada cepa BAL sobre las cepas de Salmonella. Se observó alta capacidad de inhibición de las cepas BAL 4, 3 y 21, sobre distintas cepas de Salmonella Enteritidis; BAL 3, 4 y 29 sobre dos cepas de S. Gallinarum; BAL 3; 4 y 29 sobre S. Kentucky; BAL 4, 7, 21 y 24 sobre S. Livingstone; BAL 3, 4 y 24 sobre S. Heidelberg; BAL 3, 4 y 21 sobre S. Agona; BAL 1, 2, 4 y 7 sobre S. Mbandaka y la cepa 4 sobre S. Oraniemburg. En este estudio, la cepa BAL 4 presentó la mejor capacidad de inhibición de salmonelas, característica de relevancia de una cepa probiótica.