Amino acid substitution in <i>Cryptococcus neoformans</i> lanosterol 14-α-demethylase involved in fluconazole resistance in clinical isolates

Abstract

The molecular basis of fluconazole resistance in <i>Cryptococcus neoformans</i> has been poorly studied. A common azole resistance mechanism in <i>Candida</i> species is the acquisition of point mutations in the <i>ERG11</i> gene encoding the enzyme lanosterol 14-α-demethylase, target of the azole class of drugs. In <i>C. neoformans</i> only two mutations were described in this gene. In order to evaluate other mutations that could be implicated in fluconazole resistance in <i>C. neoformans</i> we studied the genomic sequence of the <i>ERG11</i> gene in 11 clinical isolates with minimal inhibitory concentration (MIC) values to fluconazole of ≥16 μg/ml. The sequencing revealed the G1855A mutation in 3 isolates, resulting in the enzyme amino acid substitution G484S. These strains were isolated from two fluconazole-treated patients. This mutation would not intervene in the susceptibility to itraconazole and voriconazole.

Las bases moleculares de la resistencia al fluconazol en <i>Cryptococcus neoformans</i> han sido poco estudiadas. Un mecanismo de resistencia a los azoles en <i>Candida albicans</i> es la adquisición de mutaciones puntuales en el gen <i>ERG11</i>, que codifica la enzima lanosterol 14 α-demetilasa, blanco de las drogas azólicas. En <i>C. neoformans</i> solo 2 mutaciones en este gen han sido descriptas. Con el objetivo de estudiar otras mutaciones que podrían estar implicadas en la resistencia al fluconazol en <i>C. neoformans</i>, realizamos la secuenciación del gen <i>ERG11</i> de 11 aislamientos clínicos con valores de concentración inhibitoria mínima (CIM) de fluconazol ≥16 μg/ml. En 3 aislamientos, la secuenciación reveló la mutación G1855A, que da como resultado la sustitución aminoacídica G484S. Estos aislamientos fueron recuperados de 2 pacientes tratados con fluconazol. Esta mutación no intervendría en la sensibilidad al itraconazol y al voriconazol.