Mastocitos azul alciano positivos en la mucosa del ciego de conejos normales y esplenectomizados, sensibilizados y desafiados con ovoalbúmina

Abstract

La sensibilización por vía intraperitoneal produce síntesis de IgE que se une a mastocitos. Los mastocitos mucosos, cuya proliferación depende de linfoquinas de células T, permanecen sensibilizados hasta 12 semanas. Un segundo contacto con el antígeno libera mediadores de hipersensibilidad local. La esplenectomía disminuye las inmunoglobulinas circulantes y modifica la respuesta inmunitaria. Por la cecotrofia, llegan al ciego moléculas en diferentes etapas de degradación, posibilitando el contacto de antígenos con la barrera mucosa. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la cantidad de mastocitos mucosos detectables con azul alciano (AB) en el ciego de conejo normales y esplenectomizados, sensibilizados con Ovoalbúmina (OVA) y desafiados por vía oral. Conejos neozelandeses se dividieron en Grupo 1 (n=10) control no sensibilizado, Grupo 2 (n=10) sensibilizado intraperitonealmente en dos oportunidades con 2 ml de una solución de 70 µg de OVA y 30 mg de hidróxido de aluminio (ALUM)/ml, Grupo 3 (n=10) esplenectomizados y sensibilizados como el grupo 2. Los títulos de IgE específica anti-OVA fueron determinados por el test de anafilaxia cutánea pasiva. Los conejos de los grupos 2 y 3 fueron desafiados, previo ayuno de 24 horas, por instilación con sonda intragástrica, con 150 mg de OVA en 20 ml de PBS. Muestras de ciego, obtenidas 24 horas post desafío y fijadas en Carnoy se colorearon con AB pH < 1. Los mastocitos AB + se contaron en 20 campos en cada animal a 400X. El grupo 1 mostró 1,33 + 0,82 mastocitos por campo. El grupo 2: 12,88 + 2,17 (p< 0,05) y el grupo 3: 11,67 + 2,37 (p< 0,05). Los resultados muestran un marcado incremento de mastocitos mucosos en animales sensibilizados y desafiados que indicaría liberación de factores mediadores determinantes del reclutamiento mastocitario y que la esplenectomía no afectó el incremento mastocitario a nivel del ciego, con un comportamiento similar al del grupo no esplenectomizado.

The intraperitoneal sensitization induces IgE synthesis which binds to mast cells. Mucosal mast cells proliferation depends on lymphokines from T cells and remains sensitized up to 12 weeks after contact with antigen. A second interaction with antigen produces the delivery of mediators which generate a local anaphylactic reaction. Splenectomy in rabbits determines a significant decrease in seric immunoglobulins as well as modification in the immune response. Cecotrophy is a particular mechanism of rabbit digestive physiology which allows the entire antigenic molecules to be in close contact with cecal mucosal barrier. The aim of the present work was to evaluate the number of Alcian Blue (AB)-positive mast cells in cecum form both normal and splenectomized rabbits, sensitized with OVA and oral challenge. New Zealand rabbits were divided into 3 groups: Group 1 (n=10) not sensitized control. Group 2 (n=10) was twice sensitized intraperitoneally with 2 ml of a 70 micrograms OVA and 30 mg aluminium hydroxide (ALUM)/ml PBS solution. Group 3 (n=10) was splenectomized and sensibitized as group 2. Anti-OVA IgE titers were determinate by Passive Cutaneous Anaphylaxis Test (PCA). Rabbits from groups 2 and 3 were challenged with 150 mg OVA in 20 ml PBS by instillation with an intragastric canula. Samples form cecum were fixed in Carnoy and stained with AB pH<1 24 hours after challenge. AB- positive mast cells were counted in 20 fields per animal at X400. Group 1 showed 1.33 + 0.82 mast cell per field; group 2: 12.88 + 2.17 (p<0.05); Group 3: 11.67 + 2.37 (p<0.05). Results showed, firstly, an important increase in the number of mucosal mast cell in sensibitized and challenged groups which indicates the delivery of chemoatractants for recruitment of mast cell and secondly, that splenectomy induces no modifications in such mast cell increase, as seen in the not-splenectomized group.