Aplicación de las técnicas de polimorfismo de DNA en la resolución de casos de abigeato, identificación individual y determinación de paternidad

Abstract

La tipificación de los grupos sanguíneos y polimorfismos bioquímicos a partir de muestras de sangre y suero sigue siendo el estándar internacional para la certificación de paternidad. En la actualidad, las mencionadas técnicas pueden ser suplementadas con marcadores moleculares de herencia mendeliana codominante, que permiten por primera vez contar con pruebas de inclusión. El objetivo del presente trabajo consistió en resolver casos de identificación individual, paternidad y abigeato, a partir de muestras no convencionales (músculo, cuero, pelos, semen, sangre, riñón y corazón) aplicando marcadores moleculares. El DNA genómico se extrajo mediante una modificación del método descripto por Wagner y col., (1994). Los loci del BoLA y los microsatélites equinos y bovinos se analizaron mediante las técnicas de PCRRFLP y PCR-geles de secuenciación, respectivamente. En el 95% de las muestras analizadas se extrajo DNA de calidad periciable, resolviéndose el 86% de los casos. Los valores obtenidos para el índice «L» variaron desde 1 en 21.762 hasta 1 en 329.025.477 en los casos donde no se pudo realizar la exclusión, lo cual significa que existe una probabilidad entre 21762 y 329025477 de que los genotipos coincidan por azar. En el presente trabajo se demuestra que el análisis de polimorfismos del DNA es una herramienta de utilidad para resolver casos de identificación individual, paternidades y abigeato a partir de muestras no convencionales.

Up to date, the international standard for individual identification and paternity test of domestic animals are performing through blood groups and biochemistry polymorphisms of blood samples. However these techniques may be improved by the use of molecular markers. The main characteristics of them are codominant Mendelian heredity and highly polymorphisms. The aim of the present work is to apply molecular markers to resolve individual identification, paternity test and daily rob cases using no conventional samples. These samples included muscular tissue, skin, hair, semen, blood, kidney and heart. Genomic DNA were extracted using the modified method described by Wagner et al., (1994). BoLA and equine and bovine microsatellites loci were typing by PCR-RFLP and PCR-sequencing gel methods. Positive amplification could be obtained in the 95% of the genomic DNA extracted from the analyzed samples. In addition, the 86% studied cases could be resolved. In that cases where is not possible of made an exclusion, the "L" index is between 1 in 21762 - 1 in 329025477. It means that is one chance between 21762 - 329025477 that the genotypes are the same by random. In the present paper it is prove that the use of molecular markers is a useful tool to solve cases of individual identity, determination of paternity and daily rob using not common samples.