La microscopía electrónica como herramienta en la evaluación de semen canino

Abstract

La evaluación de semen canino puede brindar información importante relacionada con la capacidad fecundante del semen fresco o congelado. El estudio de la morfología espermática en el microscopio óptico provee información limitada sobre la estructura del espermatozoide. Sin embargo, el microscopio electrónico de barrido y el microscopio electrónico de transmisión pueden revelar más detalles de la estructura espermática. Es así que muchos espermatozoides considerados morfológicamente normales al microscopio óptico pueden presentar diferentes defectos al ser observados con un microscopio electrónico. El objetivo de este estudio fue describir defectos espermáticos observados en el semen canino fresco y los daños presentes en el semen canino luego del proceso de congelación. Se colectó la fracción espermática del semen de 8 caninos Ovejero Alemán. La misma fue diluida hasta una concentración espermática final de 100x106/ml y envasada en pajuelas de 0,5 ml y congelada sobre vapores de nitrógeno líquido. Una alícuota de cada fracción espermática fue preparada inmediatamente después de la colección y la otra luego de la descongelación. Las mismas fueron observadas con microscopio electrónico de barrido y microscopio electrónico de transmisión. Se describieron las anormalidades observadas en el semen fresco y los daños espermáticos ocurridos en el semen congelado.

Canine semen evaluation can give important information related to the fresh or frozen-thawed semen fertilizing ability. However routine test can not predict accurately semen fertilizing ability. Assessment of sperm morphology at the light microscopy level can provide only limited information on the structure of the spermatozoa. Transmission electron microscope and scanning electron microscope can reveal more details of sperm structure. Many spermatozoa considered morphologically normal at light microscopic level could have many defects when observed with an electron microscope. The aims this study was described morphological defects in canine fresh semen and damage observed in frozen-thawed semen. The sperm fraction was collected from 8 dogs, each was diluted in a two step dilution to a final sperm concentration of 100x106/ml and were packed in 0.5 ml straws. The straws were frozen in a Styrofoam box 4 cm above liquid nitrogen. One sample was prepared immediately after collection and the other samples were taken after freezing-thawing. Samples were observed with a transmission electron microscope and scanning electron microscope. Morphological defects and sperm damage were described in fresh and frozen-thawed semen.