Optimización del ensayo cometa mediante la utilización de microgeles únicos

Abstract

Dentro de las metodologías utilizadas en el ámbito de la Genética Toxicológica el Ensayo Cometa es reconocido por su sensibilidad, simpleza, rapidez y bajo costo. Es ampliamente utilizado para evaluar el daño genotóxico inducido por distintos agentes, y su atención en mutagénesis y biomonitoreo ambiental parece incrementarse con el desarrollo de las continuas mejoras que se van implementando. No obstante, uno de los puntos críticos es la no uniformidad de la electroforesis que aporta variabilidad a los resultados y también por la preparación de los microgeles respectivos. Se propone un nuevo protocolo como alternativa sencilla y económica a las presentes en punta. El diseño reside en ubicar la totalidad de las muestras del experimento en un solo gel de manera de compensar la utilización de materiales costosos (gel bond) y la preparación de geles individuales para cada punto. De esta manera, todas las muestras son sembradas dentro del mismo soporte y por ende se evitan las heterogeneidades consecuentes que pueden ser importantes al momento de interpretar los resultados considerando la sensibilidad extrema de la técnica y la variabilidad intrínseca del procedimiento electroforético.