Estudio y evaluación de <i>Leptolegnia chapmanii</i> Seymour (Oomycetes: saprolegniales) como agente de control biológico de <i>Aedes aegypti</i> (L.) (Diptera: culicidae)

Abstract

El aislamiento nativo de Leptolegnia chapmanii estudiado en esta investigación constituye el cuarto aislado en el mundo y el primero para la región Neotropical. El objetivo de este trabajo fue ampliar el conocimiento de la biología de este aislamiento, determinar el efecto de algunos factores bióticos y abióticos sobre la patogenicidad, virulencia y longevidad de los estados infectivos de L. chapmanii con la finalidad de determinar el potencial de L. chapmanii como agente de control biológico del mosquito vector del dengue, Aedes aegypti. Las zoosporas móviles requirieron un período breve, aproximadamente 2 minutos, para infectar las larvas de culícidos. La infección se realizó por dos vías, la penetración de las zoosporas a través de la cutícula y mediante la ingestión de zoosporas y posterior germinación de las mismas en el tubo digestivo hasta lograr la invasión del hemocel. La temperatura afectó la longevidad y la producción de zoosporas in vivo e in vitro. La mayor producción en larvas de Ae. aegypti, casi 1 x 10 5 zoosporas/larva, se obtuvo a las 48 h post-infección a 25 ºC. Las zoosporas de L. chapmanii producidas in vivo (larvas infectadas) fueron infectivas durante 51 días a 25 ºC, mientras que las colocadas a 10 ºC y 35 ºC lo fueron durante 5 y 12 días, respectivamente. Las zoosporas obtenidas a partir de medios de cultivo fueron infectivas por 5 semanas a 25 ºC, mientras que a 10 ºC y 35 ºC no fueron infectivas. La densidad de larvas y de zoosporas, así como la superficie donde se produjo el contacto, afectaron sensiblemente los porcentajes de mortalidad de las larvas, no así el volumen de agua en los recipientes que no afectó los niveles de mortalidad. Leptolegnia. chapmanii produjo una mortalidad de las larvas elevada entre 10 ºC y 35 ºC de temperatura, pH de 4 a 10 y salinidad entre 1 y 7 g/l. Además, las zoosporas toleraron elevados niveles de materia orgánica y de contaminantes en el agua, produciendo porcentajes de mortalidad entre 70 % y 99 %, en agua de zanja con elevada cantidad de materia orgánica y en agua de lluvia, respectivamente. Los efectos subletales se detectaron en los adultos emergidos a partir de larvas sobrevivientes a la exposición a zoosporas de L. chapmanii. La infección con L. chapmanii afectó la fecundidad de las hembras adultas de Ae. aegypti y se observaron diferencias significativas en el número de huevos colocados por hembras de Ae. aegypti previamente expuestas, respecto a las hembras que no estuvieron en contacto con L. chapmanii en estado de larva. La producción de oogonios y oosporas resultó afectada por la temperatura, siendo menor el tiempo requerido para la formación de oogonios y oosporas cuando la temperatura se incrementó. Las zoosporas de L. chapmanii no solo pueden utilizarse conjuntamente con larvicidas de uso generalizado en el control de culícidos, como Bacillus thuringiensis var israelensis (Bti) y el organofosforado Temefós, sino que además L. chapmanii potenció la acción larvicida de estos dos productos cuando fueron utilizados conjuntamente. La luz solar afectó negativamente la virulencia e infectividad de las zoosporas de L. chapmanii. La introducción de zoosporas de L. chapmanii en criaderos naturales de Ae. aegypti produjo una mortalidad de las larvas elevada, provocando la eliminación de las larvas entre los 15 y 22 días posteriores a la introducción de las zoosporas en los recipientes ubicados en la sombra y requiriendo de 28 a 39 días post-introducción en aquellos recipientes expuestos a la luz solar directa. Luego de un año de la introducción de L. chapmanii se redujo el número de recipientes positivos con larvas de Ae. aegypti en 33 % en los recipientes colocados al sol y en 66 % en los ubicados a la sombra. Las características biológicas de este aislamiento nativo de L. chapmanii, principalmente la elevada tolerancia de los estados infectivos a la temperatura, pH, salinidad, materia orgánica y contaminantes, lo ubican en un grupo selecto de potenciales candidatos para ser considerados como agentes de control biológico de culícidos de importancia sanitaria, particularmente Ae. aegypti. La facilidad de L. chapmanii para ser producido en medios artificiales económicos, con formación de zoosporas que mantienen una elevada virulencia es otra característica relevante que distingue a este aislamiento. Finalmente la posibilidad de combinar L. chapmanii con los dos larvicidas de uso más extenso en el mundo, lo ubican como un candidato a integrar a mediano plazo el arsenal de productos para el control racional del vector del dengue en América y así reducir las áreas de riesgo epidemiológico en el continente americano y en otras áreas en riesgo en el mundo.