Estudios sobre la peroxidación lipídica en núcleos hepáticos

Abstract

Este trabajo de tesis tuvo como finalidad estudiar la peroxidación lipídica de núcleos aislados de hígado de rata y el efecto antioxidante que podrían ejercer proteínas intracelulares encargadas del transporte de ácidos grasos de cadena larga. Como se ha demostrado la presencia de una fracción de fosfolípidos en cromatina, tanto por técnicas histoquímicas y bioquímicas en células vegetales y animales, se decidió estudiar también, como afecta la lipoperoxidación a la cromatina, obtenida por sonicación de núcleos suspendidos en sacarosa 0,25M, que fue fraccionada por sedimentación de acuerdo al siguiente esquema: 3K, 12K, 27,5K por 10 min cada una. La fracción de cromatina de más baja densidad (27,5K etanol) fue obtenida por precipitación con etanol frío del sobrenadante de la última centrifugación. En los primeros experimentos se determinó la concentración de proteínas (61,96-73,08%), DNA (24,70-35,93%) y fosfolípidos (0,80-3,14%) tanto en núcleos como en las fracciones de cromatina. El porcentaje de fosfolípidos disminuyó desde fracciones de cromatina pesada a fracciones de cromatina liviana. Durante los ensayos de peroxidación lipídica no enzimática, ascorbato-Fe 2+ dependiente, se observaron diferencias significativas en núcleos peroxidados incubados in vitro sin agregado de ácido ascórbico (control) con respecto a núcleos peroxidados en presencia de ácido ascórbico (peroxidados) que se manifestó en un aumento de la emisión lumínica (quimioluminiscencia). En las fracciones de cromatina, la emisión lumínica se mostró en orden creciente para las fracciones 3K, 12K y 27,5K, mientras que para la fracción 27,5K etanol el valor de quimioluminiscencia fue muy bajo y se mantuvo constante a lo largo del tiempo durante el proceso de lipoperoxidación.