Efecto del precondicionamiento isquémico en modelos experimentales microquirúrgicos de isquemia-reperfusión intestinal

Abstract

La injuria por isquemia-reperfusión (IIR) es una reacción inflamatoria con alta morbi-mortalidad en pacientes sometidos a un trasplante intestinal (TXI) o que sufren enfermedades intestinales como por ejemplo hernias estranguladas, vólvulos o enterocolitis necrotizante. Por tal motivo, la búsqueda de estrategias para atenuar este daño (especialmente en el TXI) constituye un gran desafío. El presente plan de tesis postula al precondicionamiento isquémico (PCI) como una estrategia capaz de atenuar la IIR intestinal en modelos experimentales, ya sea cuando se aplica sola o en combinación con otros pre-tratamientos, como el inmunosupresor tacrolimus (TAC). En el capítulo I se realizó la puesta a punto de la técnica de oclusión reversible de la arteria mesentérica superior (ORAMS) en ratones, modelo experimental de IIR intestinal utilizado en gran parte de este plan de trabajo. Además, se reportó el impacto del tiempo de isquemia en el daño intestinal y en la supervivencia de los animales intervenidos. Por último, valiéndonos de cepas de ratones mutantes, se intentó determinar alguna de las posibles causas de muerte luego del evento de isquemia-reperfusión (IR) intestinal. Utilizando el modelo de ORAMS en ratones, el Capítulo II está abocado a determinar la efectividad del PCI en la disminución del daño local y remoto ocasionado por la IIR. Por otra parte, en este capítulo se incluye al TAC como un pre-tratamiento farmacológico capaz de complementarse con el PCI al momento de disminuir el daño por IR. En el Capítulo III desarrollamos el TXI heterotópico en ratas, el cual constituye un modelo de IIR de gran complejidad por sus dificultades técnicas. Por tal motivo, en esta etapa final del plan de trabajo se reportan los detalles de la cirugía y se evalúa el PCI como terapéutica para proteger al injerto contra la isquemia fría prolongada y la reperfusión luego del trasplante.

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is an inflammatory reaction with high morbidity and mortality in patients undergoing intestinal transplantation (ITX) or suffering from intestinal diseases such as strangulated hernias, volvulus or necrotizing enterocolitis. Establishing strategies to mitigate IRI are major objectives for basic and translational research in the intestinal surgical field including transplantation. This thesis proposes ischemic preconditioning (IPC) as a strategy to attenuate intestinal IRI in animal models, either when IPC is applied alone or in combination with other pre -treatments, such as the immunosuppressant tacrolimus (TAC). Chapter I shows the surgical technique of reversible occlusion of superior mesenteric artery (ROSMA) in mice. This model of intestinal IRI was widely used in this work. Moreover, the impact of ischemia time on intestinal damage and survival of the operated animals was reported. Finally, a strain of mutant mice was used to determine some of the possible causes of death after intestinal IRI. Using ROSMA model in mice, Chapter II reports the effectiveness of IPC in reducing local and remote damage caused by intestinal IRI. Moreover, in this part of the work we combine IPC with TAC in search of synergistic or additive effects. Chapter III describes in detail the heterotopic ITX in rats, which is a model of great complexity and difficulty. In this final stage, IPC was evaluated as a strategy to protect intestinal graft against prolonged cold ischemia and reperfusion after transplantation.