Caracterización de células cepillo del cerebelo tratadas por exposición prolongada de la muestra al alcohol isopropílico en variante de impregnación argéntica

Abstract

Las células cepillo son neuronas glutamatérgicas de la capa granular en la corteza cerebelosa que constan de 3 (tres) o más subtipos, caracterizados por fenotipos químicamente distintos, propiedades intrínsecas para formar sinapsis y patrones de descarga particulares. Dichas células no fueron identificadas por métodos de impregnación argéntica hasta 1994, cuando Mugnaini realiza su descripción. En este trabajo presentamos una variante de impregnación argéntica, en el cual las muestras son sumergidas en alcohol isopropílico y luego sometidas a lavados con alcohol etílico proporcionando un proceso de rápida impregnación que reduce la observación de precipitados, y donde la cristalización se realiza de manera uniforme, lo que permite observar la integridad del cuerpo celular y sus procesos, aumentando tanto la fiabilidad de la técnica como reproducibilidad de la tinción y facilita la toma de sus dimensiones. También se destaca que el medio de montaje influye en la conservación de la calidad temporal del preparado, con una mejora de la preservación utilizando Permount vs bálsamo de Canadá.

Brush cells in the cerebellum are glutamatergic neurons of the granular layer. They are divided into three or more subtypes and were not identified by silver impregnation methods until 1994, when Mugnaini identified them using a variant of Golgi method. To make evident brush cells of the Wistar rat cerebellum, we developed a modification of the silver impregnation techniques. The improvement of method is due to the immersion of tissue sections in isopropyl alcohol following sequential washes with ethyl alcohol. It provide a quick impregnation, diminish precipitate outside cells, and the crystallization is more uniform. Morphological and morphometric studies of brush neurons stained with this technique are easy because the cell body and its processes are well observed. We also observed quality differences in the final preparation according with the mounting medium used. An improvement of the preservation was observed using Permount medium.