Estudio del rol funcional del gen RHBDD2 en líneas celulares de cáncer de mama

Abstract

La superfamilia Romboide reúne un conjunto de genes que codifican para proteínas de transmembrana multipaso que se encuentran conservadas evolutivamente en todas las ramas del árbol filogenético. Estas proteínas se agrupan según su función en: serina-proteasas y pseudoproteasas. En los seres humanos se reconocen 14 genes romboides, los cuales se encuentran involucrados en diversos procesos biológicos tales como: respuesta al estrés del retículo endoplasmático, apoptosis, proliferación y migración celular. Además, han sido asociados con diversas patologías humanas como la enfermedad de Parkinson, la artritis reumatoidea y las neoplasias malignas. El presente trabajo se centró en el estudio de Rhomboid domain containing 2 (RHBDD2) a nivel génico, transcripcional y proteico, y su rol en el cáncer de mama. Para ello, se analizó su expresión a nivel transcripcional/proteica y se realizaron ensayos de silenciamiento post-transcripcional de RHBDD2 para determinar su rol funcional. Se emplearon líneas celulares de cáncer de mama, muestras de tejidos mamarios normales y neoplásicos malignos, así como un modelo de diferenciación celular de la glándula mamaria de ratón. Se demostró que RHBDD2 se sobreexpresa en carcinomas ductales infiltrantes humanos, tanto a nivel transcripcional como proteico (p<0,05), principalmente en el subtipo Luminal B de cáncer de mama (p=0,007). Su alta expresión se encontró asociada con estadíos avanzados de la enfermedad (p<0,05) y con la ausencia del receptor de progesterona (p=0,002). Además, se determinó que RHBDD2 se localiza en el aparato de Golgi en líneas celulares de cáncer de mama (Coef. de Pearson > 0,7). Por otra parte, se comprobó que el gen RHBDD2 codifica para dos variantes transcripcionales: la variante 1 (exones: I, III, IV, V) y la variante 2 (exones: I, II, III, IV, V) así como sus respectivos productos proteicos. Por su parte la variante 2 se expresa con mayor frecuencia y cantidad en los carcinomas mamarios respecto a los tejidos mamarios normales (p<0,05), encontrándose asociado a un pronóstico desfavorable de la enfermedad. Finalmente, el análisis de los datos de microarreglos de expresión génica diferencial en respuesta al silenciamiento de RHBDD2 así como los ensayos in vitro sobre líneas celulares humanas y murinas, sugirieron que RHBDD2 se encontraría involucrado en los procesos de proliferación y diferenciación celular.