Rol de la endotelina y las especies reactivas del oxígeno en la segunda fase de fuerza post-estiramiento del miocardio

Abstract

El estiramiento del miocardio produce un aumento de la fuerza en dos fases: una inmediata, atribuida a un aumento de la respuesta al Ca 2+ de los miofilamentos y la segunda fase de fuerza (SFF) de desarrollo gradual, debida a un aumento en el transit de Ca 2+. Si bien se acepta que el aumento del transit de Ca 2+ durante la SFF resulta de la activación del modo inverso del intercambiador Na + /Ca 2+ luego de un aumento de [Na + ]i, la participación de la endotelina (ET) endógena es cuestionada. Nuestro objetivo fue demostrar que la ET es un mediador fundamental para el desarrollo de la SFF y a su vez probar si las especies reactivas del oxígeno (ROS) juegan algún papel en el mecanismo que conduce a la SFF. Los experimentos se realizaron en músculos papilares de gato en los que se midió fuerza contráctil, [Na + ]i (fluorescencia de SBFI) y ROS (fluorescencia de H2DCFD). Luego de 15 minutos de estiramiento la SFF fue 122±1 % de la fase inicial (n=4, P<0.05). El bloqueo de receptores de ET ya sea no selectivo (1 µmol/L TAK044) o específico ETA (300 nmol/L BQ123) redujo significativamente la SFF a 104±0.5 % (n=5) y 105±0.6 % (n=3) respectivamente (P<0.05 vs control). La SFF fue cancelada por inhibición de la enzima convertidora de ET (100 µmol/L phosphoramidon, SFF 98±1 %, n=5) y por bloqueo del intercambiador Na + /H + (1 µmol/L HOE642, SFF 100±0.5%, n=3). La SFF fue acompañada por un incremento en la [Na + ]i que alcanzó un valor de 2.3±0.4 mmol/L (n=4, P<0.05) sobre el control al cabo de 15 minutos, el cual fue cancelado por HOE642 (-0.1±0.1 mmol/L, n=3) y por phosphoramidon (-0.2±0.3 mmol/L, n=5). El estiramiento incrementó las ROS un 30±4 % sobre el basal (n=4, P<0.05). La prevención del aumento de ROS con MPG (2 mmol/L) suprimió el aumento de [Na + ]i (-0.1±0.3 mmol/L, n=4) y la SFF (100±2 %, n=4).Nuestros resultados demuestran que las ROS juegan un papel clave en la cadena de eventos que conducen a la activación del intercambiador Na + /H + (NHE-1) por ET luego del estiramiento.