Farmacocinética y farmacodinamia intracelular de antimicrobianos utilizados en la terapia de la mastitis subclínica bovina por <i>Staphylococcus aureus</i>

Abstract

El presente trabajo de tesis doctoral, tuvo como objetivo realizar un aporte al conocimiento de la farmacocinética (PK) intracelular (IC) de azitromicina, danofloxacina y penicilina G, así como, establecer la relación entre ésta y la interacción farmacodinámica (PD) frente a cepas de Staphylococcus aureus aisladas de vacas portadoras de mastitis subclínica. Se aislaron un total de 220 cepas, de las que se seleccionaron 10 cepas que cumplían con las características morfológicas y bioquímicas propias de S. aureus y que fueron además, sensibles a todos los grupos de antibacterianos ensayados. Las 10 cepas seleccionadas fueron sometidas a pruebas de sensibilidad para determinar la CIM de cada uno de los antibacterianos (ATB) a pH fisiológico de 7.4, así como suponer condiciones de pH intracitoplasmático y fagolisosomal, estas pruebas se repitieron a pH 5.0 y 6.5. De igual forma, en las mismas tres condiciones de pH, se realizaron estudios encaminados a determinar la cinética de muerte bacteriana por medio de curvas de letalidad y la determinación del efecto post antibiótico (PAE) de cada uno de los antibacterianos. Posteriormente, en leucocitos polimorfonucleares (PMN) extraídos de sangre y leche bovina, se realizaron pruebas de infección controlada con S. aureus, con la finalidad de medir el efecto que surten los ATB a nivel IC. Así como determinar la velocidad de penetración del ATB al interior celular, la cantidad de ATB que penetra al interior celular y su eflujo. Esto permitió realizar una integración de los parámetros PK – PD a nivel IC. La cuantificación de los analitos se llevó a cabo mediante métodos microbiológicos y por cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC). Nuestros estudios nos permitieron cuantificar la cantidad de ATB que penetra al interior celular y observar el efecto que tienen a ese nivel sobre las cepas de S. aureus fagocitadas. Se determinó que las cepas de S. aureus intracelulares tratadas con dosis terapéuticas de los 3 antibacterianos, por espacio de 5 horas, sufrieron una reducción de entre 1.8 a 2 Log10. Este estudio permite concluir entonces que azitromicina, danofloxacina y penicilna G, presentan penetracion intracelular, y su eficacia difiere en las concentraciones que estos alcanzan a nivel IC y el tiempo de permanencia dentro de la célula.