Caracterización de genes implicados en la diferenciación celular de conidios a microesclerocios en el hongo entomopatógeno Metarhizium robertsii

Abstract

El control masivo con insecticidas químicos ha provocado focos de resistencia en diferentes partes del mundo, por lo que el empleo de herramientas alternativas de control, como los hongos entomopatógenos (HE), han tomado gran impulso en los últimos años para afrontar este problema. Los HE producen estructuras de resistencia denominada microesclerocios (ME). Los ME son hifas melanizadas compactas (50-600 Âμm), tolerantes a la desecación, que en condiciones de humedad y temperatura producen conidios infecciosos y presentan potencial para su uso en el programa de control biológico de artrópodos vectores o plagas agrícolas. El objetivo del trabajo fue comprender la metamorfosis y la diferenciación celular desde hifas a microesclerocios del hongo entomopatógeno M. robertsii (ARSEF 2575), basada en el patrón de expresión de los genes marcadores de: estrés oxidativo (superóxido dismutasas, sod; catalasas, cat y glutatión peroxidasas, gpx), biogénesis de peroxisomas (peroxinas, pex), hidrofobicidad superficial (hidrofobina, ssga) y síntesis de pigmentos (policétido sintasas, pks y lacasas, lac). El hongo fue cultivado en un medio líquido específico rico en carbono y nitrógeno (relación 30:1). Las alícuotas fueron observadas durante los cuatros días de cultivo observada al microscópico óptico. Además, muestras de cada día fueran preparadas para la extracción de RNA y cuantificación de la expresión génica por PCR en tiempo real. Se evidenció una inducción de genes antioxidantes, peroxinas y genes involucrados en la pigmentación, así como la actividad peroxidasa aumentada, en los cuatro días de cultivo del microesclerocios. La mayor expresión fue al cuarto día de desarrollo, cuando los ME están maduros. El estrés oxidativo y genes involucrados en la biogénesis son importantes para la diferenciación y desarrollo en ME de hongos entomopatógenos. Así, los resultados aportaran información valiosa tanto biológica como bioquímica y molecular acerca de la metamorfosis del microesclerocios del aislado ARSEF 2575.