PCR múltiple para la detección de los genes <i>sea, seb, sec, sed</i> y <i>see</i> de <i>Staphylococcus aureus</i>

Abstract

La presencia de <i>Staphylococcus aureus</i> en los alimentos representa un riesgo potencial para la salud pública; sus enterotoxinas son el principal factor de virulencia. La detección de las enterotoxinas de <i>S. aureus</i> puede realizarse por ELISA, aunque sólo es posible detectar el <i>pool</i> de enterotoxinas SEA, SEB, SEC, SED y SEE. Los objetivos del presente trabajo fueron optimizar dos técnicas de PCR múltiple para la detección de los genes <i>sea, seb, sec, sed</i> y <i>see</i> de <i>S. aureus</i> y caracterizar un conjunto de 115 aislamientos de Staphylococcus spp. asociados a intoxicaciones alimentarias provenientes de diferentes provincias de Argentina. La caracterización se realizó por pruebas bioquímicas, ELISA y PCR. Sesenta y ocho aislamientos (59,1%) fueron positivos por ELISA, mientras que 61 (53%) fueron positivos por PCR. De los aislamientos positivos por PCR, 34 (55,7%) portaron el gen <i>sea</i>, 9 (14,8%) el gen <i>seb</i>, 5 (8,1%) el gen <i>see</i>, 4 (6,5%) el gen <i>sec</i>, 6 (9,9%) los genes <i>sea</i> y <i>seb</i>, 2 (3,3%) los genes <i>sea</i> y <i>sec</i>, y 1 (1,7%) los genes <i>sea</i> y <i>sed</i>. Este es el primer estudio de caracterización genotípica de aislamientos de <i>S. aureus</i> asociados con brotes de intoxicación alimentaria registrados en distintas provincias argentinas.

The presence of <i>Staphylococcus aureus</i> in food represents a potential risk to public health, being its enterotoxins the major virulence factor. Enterotoxin detection can be determined by ELISA, but only for the pool of enterotoxins SEA, SEB, SEC, SED and SEE. The main aims of this study were to optimize two PCR techniques for detection of <i>S. aureus</i> <i>sea, seb, sec, sed</i> and <i>see</i>, and to characterize Staphylococcus spp. isolates associated with food intoxication. Two PCR techniques were optimized and 115 Staphylococcus spp. isolates from Ciudad Autónoma de Buenos Aires, and Buenos Aires, Córdoba, and Neuquén provinces were characterized. The characterization was performed by biochemical tests, ELISA and PCR. Sixty-eight isolates (59.1%) were positive by ELISA, while 61 (53%) were positive by PCR. Out of the positive PCR isolates, 34 (55.7%) carried the sea gene, 9 (14.8%) the <i>seb</i> gene, 5 (8.1%) the <i>see</i> gene, 4 (6.5%) the <i>sec</i> gene, 6 (9.9%) were positive for <i>sea</i> and <i>seb</i> genes, 2 (3.3%) for <i>sea</i> and <i>sec</i> genes, and 1 (1.7%) for <i>sea</i> and <i>sed</i> genes. This is the first study of genotypic characterization of <i>S. aureus</i> isolates associated with food intoxication from different provinces of Argentina.