Efecto del medio y el tiempo de almacenado sobre los cambios histológicos y ultraestructurales en células epididimales caninas

Abstract

Nuestro objetivo fue evaluar cambios histológicos y ultraestructurales en epidídimos de caninos (n = 22) almacenados a 4°C en dos medios [solución fisiológica (SF) o tris yema de huevo (TYH)]. Nuestra hipótesis fue que el almacenado de los epidídimos en TYH retrasaría los fenómenos de autolisis a nivel celular. Cuatro colas epididimales fueron fijadas y procesadas inmediatamente y las restantes 18 fueron almacenadas a 4°C en SF o TYH durante 24, 48 ó 72h. En los cortes histológicos, se puntuaron las características nucleares y la morfología de las estereocilias de 0 a 3. Los mismos grados se utilizaron en los cortes ultrafinos para la cromatina nuclear y la morfología de las estereocilias. Además, usando la microscopía electrónica de transmisión se registró el número y área nuclear y mitocondrial. En el estudio histológico, los parámetros cambiaron significativamente con el tiempo (p <0,01), aumentando los cambios morfológicos al aumentar el tiempo de almacenado. En el estudio ultraestructural, la cromatina nuclear y la morfología de las estereocilias desmejoraron con el tiempo (p <0,01) pero no hubo diferencias significativas entre los dos medios de almacenado. Asimismo, el número de mitocondrias disminuyó con el aumento del tiempo de almacenado (p < 0,05) sin observarse efectos del medio ni del tiempo sobre las demás variables. En conclusión, estos resultados muestran que la SF y el TYH conservan por igual las células epiteliales caninas durante el almacenado.

Our objective was to evaluate histological and ultrastructural changes in canine epididymis (n = 22) stored at 4°C in two media [physiological solution (PS) or egg yolk tris (TEY)]. The hypothesis was that the epididymides stored in TEY autolysis delays phenomena at the cellular level. Four epididymal tails were fixed and processed immediately and the remaining 18 were stored at 4°C in SF or TEY for 24, 48 or 72h. The same grades were used for nuclear and chromatin morphology at the ultrathin sections. In addition, nuclear number, nuclear area, mitochondrial number and mitochondrial area using transmission electron microscopy were recorded. The nuclear characteristics and morphology of the stereocilia were scored from 0 to 3 at histological sections. The histological study, parameters changed significantly over time (p < 0, 01), increasing the morphological changes over time. At the ultrastructural study, nuclear chromatin and morphology of the stereocilia were affected negatively over time (p < 0, 01), but there were no significant differences between the two storage media. Also, the number of mitochondria decreased with increasing storage time (p < 0, 05) with no observed effects on the other variables. In conclusion, these results show that TEY is as good as PS to preserve canine epithelial cells during storage.