Infección con el virus de la inmunodeficiencia felina: desarrollo y aplicación de una técnica de doble reacción en cadena de la polimerasa (PRC) para el diagnóstico

Abstract

Se desarrolló una técnica de doble reacción en cadena de la polimerasa ("Nested PCR") para la detección directa del virus de la Inmunodeficiencia Felina (VIF). Se evaluaron dos métodos de extracción de DNA proviral y cuatro pares de cebadores. Se estandarizó el método de amplificación y la especificidad fue determinada por digestión de los productos de PCR con enzimas de restricción. La determinación de anticuerpos se realizó con un equipo comercial. Se trabajó con 30 muestras de sangre heparinizada provenientes de gatos con y sin signos clínicos compatibles con la infección con VIF. En 17 de las muestras examinadas se detectaron anticuerpos específicos contra VIF y DNA proviral. La técnica de PCR desarrollada resultó sensible y específica y podría ser utilizada cuando se presentaran resultados serológicos dudosos o para la detección del provirus en gatos con infecciones recientes.

A Nested PCR technique for direct identification of Feline Immunodeficiency Virus (FIV) was developed. Two methods for proviral DNA extraction and two pairs of primers were evaluated. The method for amplification was standardized and its specificity was determined by the restriction endonucleases digestion of PCR products. Antibodies specific to FIV were determined using a commercial kit. Thirty heparinized blood samples obtained from cats with and without clinical signs consistent with FIV infection were analyzed. In 17 of the samples antibodies specific to FIV and proviral DNA were detected. The PCR technique proved sensitive and specific. It could be useful in the presence of doubtful serologic results and to detect provirus in cats with recent infections.