El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto protector de Trehalosa (T) y la combinación de T y SDS, a diferentes concentraciones T0; T1,6 (0,156%); T3,3 (0,312%); T6,3 (0,624%) y T3,3 con SDS12 (0,125%); SDS20 (0,250%); SDS50 (0,500%), adicionadas a un diluyente (DIL) base EDTA-Lactosa con 20% de yema de huevo y 5% de dimetilformamida sobre el espermatozoide equino durante el proceso de congelación y descongelación. Los eyaculados de equinos raza Criolla Argentino (n=10, r=2), fueron filtrados y se evaluaron las características macroscópicas: Color, Aspecto, Volumen (ml) y microscópicas: Movilidad (M) (AndroVision®, MinitübGmbH, Tiefenbach, Germany), Porcentaje de vivos (PV; tinción de Eosina-nigrosina); prueba de HOS (% de colas enrolladas post incubación en solución de lactosa 50mOsm) y Acrosomas intactos (AI; conjugado de FITC-PSA). El semen fue diluido 1:1 en un diluyente Kenney, dividido en alícuotas, centrifugado, resuspendido a 200 x 106 esp/mL en el diluyente base con diferentes concentraciones de T y las combinaciones de T y SDS. El semen fue empaquetado en pajuelas de 0,5 ml y congelado sobre vapores de nitrógeno líquido. Las pajuelas fueron descongeladas a 37° durante 1 minuto y sometidas a las mismas pruebas que el semen fresco. Las comparaciones entre tratamientos (DIL) se realizaron mediante el análisis de varianza utilizando el procedimiento GLIMIX de SAS® para mediciones repetidas entiempo. Se observó que el DIL conteniendo T3,3 fue más efectivo en proteger la membrana acrosomal cuando se comparó con las combinaciones de T3,3SDS12 y T3,3SDS20. A su vez, se observó un efecto deletéro del SDS a altas concentraciones sobre la célula espermática del equino.