Comparación de cuatro antígenos para la determinación de anticuerpos antileptospiras en serología por ensayo inmuno enzimático (ELISA) en leptospirosis canina

Abstract

Introducción. La Leptospirosis es una enfermedad, que frecuentemente pasa sub diagnosticada debido a la falta de una prueba de diagnóstico de fácil realización. Dentro de las técnicas de laboratorio, las inmuno-enzimáticas, se encuentran entre las de mayor sensibilidad. El presente trabajo tiene por objetivo el desarrollo de la técnica de ELISA, que permita la detección diagnóstica de la Leptospirosis en forma rápida, sencilla y económica. Material y métodos. Se utilizaron como antígeno (Ag) cultivos vivos de Leptospira interrogans sv. icterohaemorrhagiae con distintos tratamientos: cultivo total, sonicado, termo resistente (TR) y TR sonicado. La prueba se realizó con 29 sueros caninos sospechosos clínicamente de leptospirosis, diluido en PBS 1/8; utilizándose 3 controles negativos y 3 controles positivos. Todos los sueros fueron comparados con la técnica de Aglutinación Microscópica (MAT) utilizando como Ag la misma cepa utilizada para ELISA. Resultados. Los resultados de este estudio muestran que de 29 sueros analizados 10 (34%) dieron resultados positivos. Todos los controles positivos dieron desarrollo evidente de color en los pocillos, no variando su color los controles negativos. La correlación con la técnica de MAT fue de +0,80 (Ag sonicados) y +0,70 (Ag sin sonicar) según los antígenos utilizados. Discusión. Esta técnica de rápida realización (150 minutos) podría ser adaptada a cualquier laboratorio y permitiría su uso como método de diagnóstico tamiz de Leptospirosis en caninos.

Introduction. Leptospirosis is a disease that frequently turns out sub diagnosed due to the lack an easily performed diagnostic test. Among the diagnostic techniques, the immuno enzymatic ones are among those of greater sensibility. The aim of this study is to develop the techniques of ELISA that allow for the diagnostic detection of Leptospirosis in a quick, simple and economic way. Material and methods. Live cultivation of Leptospira interrogans sv icterohaemorrhagiae were used as antigen (Ag) with different treatment: total Ag, sonicated Ag, thermo resistant Ag (TR) and sonicated TR Ag. The test was carried out on 29 clinically suspicious canine sera of leptospirosis, diluted in PBS 1/8; using 3 negative and 3 positive controls. All sera were compared with Microscopic Agglutination Test (MAT) using as Ag the same strain used in ELISA. Results. The results of this study show that out of 29 analyzed sera 10 (34%) were positive. All the positive control gave evident color development in the wells, with no change in the negatives ones. Correlation with the technique of MAT was +0.80 (sonicated TR) and +0.70 (TR) according to the antigen used. Discussion. This quick technique (150 min) could be adapted to almost any laboratory and could be used as a diagnostic screening method of canine leptospirosis.