Organogénesis directa e indirecta a partir de segmentos nodales, hojas y raíces de Eugenia involucrata DC

Abstract

Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae), conocida vulgarmente como “cerella”, es un árbol nativo de Argentina, Brasil, Paraguay y Uruguay, con importante potencial económico. Su propagación y conservación están limitados por la característica recalcitrante de sus semillas, siendo el cultivo de tejidos un método eficiente para estos fines. En este trabajo se evaluó el efecto del tipo de explante y distintas combinaciones de reguladores de crecimiento vegetal, 6-bencilaminopurina (BAP), tidiazurón (TDZ) y ácido 1-naftalen acético (ANA) en la formación de brotes adventicios, enraizamiento y formación de plántulas de E. involucrata. Se desarrollaron tres experimentos, i) inducción; ii) diferenciación de brotes y iii) aclimatización en invernáculo de las plántulas obtenidas. Las hormonas BAP y TDZ indujeron callos y brotes a partir de segmentos nodales, radiculares y foliares. El máximo porcentaje de formación de brotes por organogénesis directa se obtuvo en segmentos nodales cultivados en medio MS ½ suplementado con 2,25 mg L⁻¹ de BAP y la máxima frecuencia de formación de callos se obtuvo en explantos nodales o radiculares cultivados en medio MS ½ suplementado con TDZ, solo o combinado con ANA. La máxima formación de brotes adventicios, por organogénesis indirecta, se obtuvo en segmentos nodales, inducidos en medio MS ½ suplementado con 1,1 mg L⁻¹ de TDZ+0,93 mg L⁻¹ de ANA y subcultivados en medio MS ½ con 0,5 mg L⁻¹ de TDZ y 1 g L⁻¹ de carbón activado. Los ápices de los brotes obtenidos a partir de organogénesis directa e indirecta enraizaron in vitro en medio MS ½ libre de reguladores de crecimiento vegetal (RCV), formando plántulas que luego se aclimataron en invernáculo, demostrando un alto porcentaje de supervivencia a los seis meses de trasplante.

Eugenia involucrata DC. (Myrtaceae), popularly known as “cerella”, is a native tree of Argentina, Brazil, Paraguay and Uruguay, with an important economic potential. Its propagation and conservation are limited by the recalcitrant characteristic of its seeds, being tissue culture an efficient method for these purposes. In this work, the effect of explant type and different combinations of plant growth regulators, 6-benzylamonipurine (BAP), thidiazuron (TDZ) and 1-naphtalen acetic acid (NAA) on adventitious shoot formation, rooting and seedling formation of E. involucrata were evaluated. Three experiments were developed, i) induction; ii) shoot differentiation and iii) greenhouse seedling acclimatization. BAP and TDZ hormones induced callus and shoots from nodal, root and leaf segments. The maximum percentage of shoot formation by direct organogenesis was obtained in nodal segments grown on MS ½ medium supplemented with 2.25 mg L⁻¹ BAP and the maximum frequency of callus formation was obtained in nodal or root explants grown on MS ½ medium supplemented with TDZ, alone or combined with NAA. Maximum adventitious shoot formation, by indirect organogenesis, was obtained in nodal segments, induced on MS ½ medium supplemented with 1.1 mg L⁻¹ TDZ+0.93 mg L⁻¹ NAA and subcultured on MS ½ medium with 0.5 mg L⁻¹ TDZ and 1 g L⁻¹ activated charcoal. Shoot apices obtained from direct and indirect organogenesis rooted in vitro on Plant Growth Regulators (PGRs)-free MS ½ medium, forming seedlings that were then acclimatized in greenhouses, showing a high survival rate six months after transplanting.