Estudios de supervivencia y fertilidad de semen canino criopreservado

Abstract

El objetivo de esta tesis fue de optimizar un protocolo de refrigeración y uno de congelación de semen canino para implementarlos en Argentina. Se realizaron 4 experimentos. En el primero se estudió el efecto de tres diluyentes (fracción prostática, Tris yema de huevo, MRA) y dos temperaturas (4º C, 15° C) sobre la supervivencia espermática durante 4 días. El MRA mantuvo el semen con más del 50% motilidad, endósmosis positiva y acrosomas intactos, con más del 25% de espermatozoides vivos y con vigor superior a 3 luego de 4 días a 4º C. Además, mantuvo la osmolalidad dentro del rango del semen fresco. No hubo diferencias en los parámetros espermáticos cuando el semen fue refrigerado con MRA a 4º C y 15° C. En el segundo experimento se estudió el efecto del agregado de diferentes porcentajes de Equex al diluyente con Base Tris (TB) sobre la viabilidad espermática y los cambios ultraestructurales ocurridos en los espermatozoides al descongelado. Aquí se observó que el diluyente TB con el agregado de 1,5% de Equex protegía más eficientemente a los espermatozoides (índice al descongelado >80%), y reducía un 20% el daño celular observado por microscopía electrónica al descongelado. Posteriormente se evaluó el efecto de diferentes concentraciones de trealosa incorporadas al diluyente en TB sobre la viabilidad espermática al descongelado. El agregado de trealosa al TB no mejoró la calidad del semen al descongelado. Finalmente se evaluó la fertilidad mediante un programa de inseminación artificial (IA) utilizando un diluyente TB con y sin el agregado de 1,5% de Equex. Las IA en las cuales se utilizó el diluyente TB con el agregado de 1,5% de Equex si bien tuvieron un 28% más de preñez con respecto a las LA con el diluyente TB sin el agregado de Equex, estas diferencias no fueron significativas. Si bien en las IA en las cuales se utilizó el diluyente TB con el agregado de 1,5% de Equex se observo un 28% más de preñez con respecto a las IA realizadas con el diluyente TB sin el agregado de Equex, las diferencias encontradas no fueron significativas.