Adaptación del ensayo colorimétrico del MTT para la evaluación de la actividad frente a Giardia duodenalis

Abstract

Giardia duodenalis es un parásito protozoario flagelado cosmopolita con un amplio rango de hospedadores, incluyendo tanto animales domésticos como salvajes, así como al ser humano. Se reproduce en el intestino delgado ocasionando giardiosis, enfermedad caracterizada por producir diarrea, cólicos abdominales, pérdida de peso y malabsorción. El presente trabajo tiene como objetivo la estandarización del método colorimétrico del MTT (bromuro de 3-(4,5- dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol) para la realización de ensayos de actividad in vitro frente a trofozoítos de G. duodenalis. El MTT ha demostrado ser útil en la determinación de productos activos frente a diversos biomodelos y un buen sustituto del recuento microscópico en la determinación de la viabilidad de los parásitos. Para adaptar este método a G. duodenalis se realizaron una serie de ensayos a fin de optimizar la prueba, empezando con la realización de curvas de crecimiento para observar el comportamiento de los cultivos de este protozoario. Además, se realizaron otros ensayos modificando ciertas variables como el inóculo inicial, la fase del cultivo o las concentraciones de reactivos, dando como resultado un protocolo efectivo estandarizado. Los resultados de este estudio pueden ser de gran utilidad para identificar compuestos con actividad frente a G. duodenalis.dengue, pero ¿cómo explicar la desatención de esa virosis por el conocimiento público en 2023?

Giardia duodenalis is a cosmopolitan flagellated protozoan parasite with a wide range of hosts, including both domestic and wild animals, as well as humans. It reproduces in the small intestine causing giardiosis, a disease characterized by diarrhea, abdominal cramps, weight loss, and malabsorption. The aim of this study is to standardize the colorimetric MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) method for in vitro assays against G. duodenalis trophozoites. The MTT has been shown to be useful in determining active products against various biomodels and a good substitute for microscopic counting in determining parasite viability. To adapt this method to G. duodenalis, a series of assays were performed to optimize the test, starting with growth curves to observe the behavior of the protozoan cultures. Multiple assays were then performed, modifying certain variables such as initial inoculum, culture phase, or reagent concentrations, resulting in an effective standardized protocol. The results of this study can be of great utility in identifying compounds with activity against G. duodenalis.