Estudio del efecto de metales sobre un sistema enzimático utilizable como herramienta bioanalítica en la evaluación de procesos tecnológicos y en el diagnóstico ambiental

Abstract

En el año 1992, la Conferencia de Naciones Unidas sobre el Medio Ambiente y el Desarrollo generó un programa para promover el desarrollo sostenible denominado Agenda 21. Este programa es un plan detallado de acciones que deben ser acometidas a nivel mundial, nacional y local para articular las relaciones existentes entre salud, desarrollo y degradación ambiental. Uno de los temas conflictivos planteados fue la disminución de la calidad y la disponibilidad del agua En lo referente a la evaluación de efectos producidos por contaminantes ambientales, se han venido desarrollando métodos de alta sensibilidad basados en el análisis de la toxicidad con organismos de diferente nivel de organización y escala trófica. En estos ensayos la realidad ecológica es inversamente proporcional a la complejidad del método. Para el monitoreo de muestras ambientales se está prestando particular atención a aquellos que utilizan microorganismos y enzimas como sistema de diagnóstico, muchos de los cuales se comercializan como ‘kits’, los que frecuentemente recurren a las bacterias como organismos de referencia por su factibilidad y simplicidad en el manejo. Estas pruebas se caracterizan por requerir pequeños volúmenes de muestra, posibilitar la realización de gran cantidad de réplicas, mejorándose de esta manera la reproducibilidad de los resultados; también permite el procesamiento de un número elevado de muestras en forma simultánea a campo ó en pequeños laboratorios, ser de bajo costo y sencillos de practicar. Generalmente, los kits de diagnóstico ambiental responden de manera general a los tóxicos, sin diferenciar respuestas específicas a metales pesados o contaminantes orgánicos. Sin embargo, existen algunos antecedentes de TM bioensayos con mayor especificidad a metales tales como MetPAD, TM TM MetPLATE, MetPLANT basados en la inhibición de la enzima B- galactosidasa clonada en Escherichia coli. En el presente trabajo de tesis, se desarrolla el bioensayo de toxicidad basado en la inhibición de la actividad de la enzima B-galactosidasa de la levadura Kluyveromices lactis in vitro, teniendo en cuenta que los antecedentes existentes.