Enzimas fúngicas extremófilas de aplicación biotecnológica: producción y caracterización de ramnosidasas alcalofílicas de Acremonium murorum y Acrostalagmus luteo-albus y poligalacturonasa acidofílica de Aspergillus kawachii

Abstract

En la actualidad los procesos enzimáticos han ido reemplazando algunos de los procesos químicos tradicionales, por cuestiones económicas, ecológicas o por especificidad. Sin embargo, muchas de las enzimas disponibles no soportan las condiciones de reacción industriales. Como resultado de esto, los microorganismos extremófilos son una valiosa fuente de nuevas enzimas. En base a lo expuesto, se plantearon los siguientes objetivos: • Realizar un screening de actividades enzimáticas de ocho cepas de hongos alcalino-tolerantes o alcalofílicos aislados localmente, focalizando el mismo en las enzimas que degradan pared celular vegetal. • Estudiar la producción y purificación de las Rhasas producidas por A. luteo-albus y por A. murorum a los efectos de optimizar la cantidad de enzima producida y de esta forma poder contar con suficiente cantidad de proteína para caracterizarlas bioquímicamente. • Determinar la capacidad de las Rhasas en estudio para hidrolizar sustratos naturales en condiciones de alcalinidad. • Desarrollar diferentes estrategias de clonado del gen que codifica para la poligalacturonasa ácida (PG1) de A. kawachii. • Analizar la expresión de PG1 activa en cada caso, y caracterizar la proteína obtenida a los efectos de evaluar su posible aplicación en procesos biotecnológicos. • Estudiar el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae recombinante en un medio de cultivo sintético y su capacidad de producir PG1 recombinante. • Determinar las mejores condiciones de producción de la enzima recombinante en sistemas batch y batch alimentado. • Purificar y caracterizar la proteína obtenida respecto de las características de la enzima silvestre.