Los vertebrados están representados en la naturaleza por alrededor de 62.000 especies, de las cuales más del 40 % vive en ambientes acuáticos y la mayoría corresponde a los peces. En esta sala pueden contemplarse varias de las especies pertenecientes al grupo mencionado junto a reptiles, anfibios, aves y mamíferos. En las vitrinas laterales se observan peces de importancia comercial y recreativa, tanto marinos como de agua dulce, y sus fondos tratan de representar los ambientes en los que habitan. Entre ellos se destaca el manguruyú, que es la especie de mayor tamaño de los ríos de Argentina; el dorado, muy apreciado en la pesca recreativa; la particular mojarra desnuda, especie amenazada, que vive en un área restringida y es el pez emblema de la ictiología nacional.