Regulación del gen PEIG-1/GPRC5A por 12-O-tetradecanoilforbol-13-acetato

Abstract

Los receptores acoplados a proteínas G (“G protein-coupled receptors”, GPCRs), son proteínas integrales de membrana en la superficie celular y pertenecen a una de las superfamilias más grandes y diversas de receptores. Más del 30 % de las drogas farmacéuticas disponibles comercialmente ejercen su efecto por medio de esta clase de receptores. GPRC5A, también conocido como proteína 3 inducible por ácido retinoico (RAI3) o gen 1 inducible por ácido retinoico (RAIG1), fue clonado por primera vez en nuestro laboratorio con el nombre de gen 1 inducible por éster de forbol (“phorbol ester induced gene 1” o PEG-1), ya que fue encontrado por ser un gen inducible por 12 - O -tetradecanoilforbol-13-acetato (TPA/PMA). Comúnmente, TPA es empleado como agente promotor de tumores, aunque también se ha observado una disminución en la capacidad proliferativa en células de linfoma tratadas con TPA. La desregulación de GPRC5A, ha sido relacionada con el desarrollo de distintos tipos de cáncer en humanos y con su capacidad supresora de tumores, dependiendo del tejido. En este trabajo, se demostró que la inducción de GPRC5A por TPA, en células T84 de cáncer de colon, es regulada positivamente por las vías de señalización PKC/Ca2+, PKA, MEK y SGK1; mientras que es regulada negativamente por JNK. Las vías de señalización AKT, p38, NF-ĸB, IL-1β, Cl- y las ROS no se encuentran involucradas en su regulación por TPA. Por otro lado, TPA produjo un aumento en la producción de ROS celular y mitocondrial, efecto que fue reducido en células silenciadas en la expresión de GPRC5A mediante transfección con el plásmido CRISPR/Cas9 para este gen (T84/pARNg3); esto sugiere que la señalización de GPRC5A reduce la producción de ROS mediada por TPA -->PKC. Además, se observó que TPA redujo la apoptosis celular, mientras que las células T84/pARNg3 tratadas con TPA la aumentaron. La apoptosis fue mediada por caspasa 3, pero no por caspasa 8 y 9. Los resultados sugieren que GPRC5A participa en la regulación de la apoptosis mediada por caspasa en células T84 de cáncer de colon.