Búsqueda de proteasas en plantas de la Patagonia

Abstract

El objetivo general de este trabajo fue hallar una planta de la flora de la Patagonia que resultara una fuente promisoria de endopeptidasas cisteínicas, lograr el aislamiento, purificación y caracterización de las fracciones activas de interés y clonar y Secuenciar los ADNc correspondientes a endopeptidasas cisteínicas a partir de ARNm presentes en el látex de dicha especie. A partir de este objetivo general se plantearon los siguientes objetivos específicos: - Seleccionar y recolectar plantas de la Patagonia extraandina -en particular de las familias Apocynaceae y Euphorbiaceae- para evaluar y caracterizar parcialmente la capacidad proteolítica de sus extractivos. - Caracterizar la preparación con mayor actividad endopeptidásica. - Obtener hidrolizados proteicos parciales con posible aplicación industrial empleando la preparación enzimática seleccionada. - Purificar las fracciones enzimáticas de mayor interés. Caracterizar bioquímica y estructuralmente las peptidasas purificadas. - Clonar y Secuenciar ADNc correspondiente a proteasas cisteínicas a partir del ARN total del látex de la especie seleccionada para obtener su secuencia polipeptídica. - Obtener por homología un modelo para la estructura tridimensional (3-D) de las enzimas cuya estructura primaria ha sido determinada.